[发明专利]一种液质联用分析生物样品中卡西酮、甲卡西酮、4-甲基甲卡西酮的方法

摘要

本发明公开一种液质联用分析生物样品中卡西酮、甲卡西酮、4‑甲基甲卡西酮的方法，其包括(1)样品溶液的制备；(2)标准工作液的制备；(3)检测条件的设置；(4)液质联用测定；(5)实验结果计算。本发明通过对生物样品的前处理过程，实现了卡西酮、甲卡西酮、4‑甲基甲卡西酮的高效、准确检测，为司法部门定罪量刑提供技术支持。

主权项

一种液质联用分析生物样品中卡西酮、甲卡西酮、4‑甲基甲卡西酮的方法，其包括如下步骤：(1)样品溶液的制备；(2)标准工作液的制备；(3)检测条件的设置；(4)液质联用测定；(5)实验结果计算；步骤(1)样品溶液的制备过程如下：生物样品用水按生物样品与水的体积比2:1‑1:2的比例稀释后，加入蛋白质沉淀剂，蛋白质沉淀剂加入至样品中不再生成沉淀为止，随后超声振荡10‑20min后，以2000‑4000r/min低速离心5‑20min，上清液过凝胶色谱柱，凝胶色谱柱填料为苯乙烯树脂，采用乙酸乙酯/环己烷溶液洗脱，经凝胶色谱柱净化后获得提取液，提取液经氮吹至近干后，加流动相定容后，即得样品溶液；流动相与步骤(3)中的流动相相同；步骤(2)中，分别取卡西酮、甲卡西酮、4‑甲基甲卡西酮标准储备溶液，分别依次稀释成质量浓度分别为10000、5000、2500、1000、500、250、100、10、1、0.1ng/mL的三个系列标准溶液；步骤(3)中，质谱条件的设定过程为：A、确定准分子离子；B、通过选择离子扫描，优化毛细管出口电压；C、通过子离子扫描，选择子离子，同时优化碰撞能量；D、建立多反应监测MRM方法；E、离子源参数的优化，其中，对卡西酮、甲卡西酮、4‑甲基甲卡西酮及常见掺假剂通过选择母离子和子离子，优化Fragmentor电压和CE值，获得最优MRM参数，进而建立质谱库，如表1所示：表1步骤E中，优化后的离子源参数为：干燥气温度：350℃，干燥气流量：10L/min，雾化气压力：25psi；步骤(3)中，液相色谱条件的设定过程为：色谱柱：反相C18色谱柱，100mm×2.1mm,1.8μm，流动相：A‑0.2％甲酸，B‑乙腈，C‑甲醇，程序升温，过程见表2：表2流速：0.4mL/min。