[发明专利]一种大肠杆菌外膜蛋白疫苗的制备方法在审
| 申请号： | 201510257893.2 | 申请日： | 2015-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN106267179A | 公开（公告）日： | 2017-01-04 |
| 发明（设计）人： | 王建华;管庆丰;滕达;王秀敏;毛若雨;王潇 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院饲料研究所 |
| 主分类号： | A61K39/108 | 分类号： | A61K39/108;A61P37/00;A61P31/04;C12N1/21;C12P21/02;C12N15/63;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100081*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种大肠杆菌外膜蛋白BamA的制备方法及其应用。培养大肠杆菌菌株并提取其DNA，设计大肠杆菌外膜蛋白表面抗原区域(Bac_surface_Ag，rBamA，第448～810位氨基酸)基因序列的引物对，以大肠杆菌基因组DNA为模板进行PCR扩增。PCR产物和载体pET-28a(+)连接并转化E.coli BL21感受态细胞中，采取IPTG诱导的方法，诱导大肠杆菌外膜蛋白rBamA表达。经过纯化最终得到重组的大肠杆菌外膜蛋白rBamA。该重组外膜蛋白具有一定的免疫原性及抗原性，能够有效抵抗大肠杆菌的感染，以及大肠杆菌所引起的疾病。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大肠杆菌 膜蛋白 疫苗 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种抗大肠杆菌感染的基因工程疫苗的制备方法，其特征在于首先提取大肠杆菌基因组，扩增其外膜蛋白BamA表面抗原区域基因，连接重组表达载体pET‑28a，转化大肠杆菌BL21。通过IPTG诱导大肠杆菌表达的包涵体利用8mol/L尿素和LDAO进行复性，并通过镍柱进行纯化获得重组外膜蛋白rBamA。
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