[发明专利]一种共表达口蹄疫病毒VP1基因与免疫佐剂牛IL-6基因的重组乳酸杆菌及其制备方法和应用有效
申请号: | 201510258195.4 | 申请日: | 2015-05-19 |
公开(公告)号: | CN104894045B | 公开(公告)日: | 2018-08-10 |
发明(设计)人: | 潘丽;张永光;张中旺;吕建亮;王永录;方玉珍;周鹏;刘新生 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/62;C12N15/42;C12N15/24;A61K48/00;A61K39/39;A61K39/135;A61P31/14 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;费碧华 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明公开了一种共表达口蹄疫病毒VP1基因与免疫佐剂牛IL‑6基因的重组乳酸杆菌及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明对乳酸杆菌信号肽的结构进行改造,将改造的乳酸杆菌信号肽基因借一连接短肽GSGGSGG与口蹄疫病毒VP1基因进行连接,连接后的基因序列再与免疫佐剂牛IL‑6基因序列进行融合,融合后的基因序列插入大肠杆菌‑乳酸菌穿梭表达载体中,构建重组质粒pSIP/Asia1/VP1/IL‑6,将pSIP/Asia1/VP1/IL‑6重组质粒转化至乳酸杆菌。本发明针对重组乳酸杆菌表达系统,适当改造信号肽结构以提高乳酸杆菌中外源蛋白的分泌效率,通过黏膜免疫途径免疫实验动物,研究该疫苗的黏膜免疫情况,为研发新型口蹄疫黏膜免疫疫苗提供实验基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 表达 口蹄疫病毒 vp1 基因 免疫佐剂 il 重组 乳酸 杆菌 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种共表达口蹄疫病毒VP1基因与免疫佐剂牛IL‑6基因的重组乳酸杆菌,其特征在于,所述重组乳酸杆菌含有由在N端引入改造的乳酸杆菌信号肽基因的口蹄疫病毒VP1基因序列与免疫佐剂牛IL‑6基因序列连接在一起而得到的融合基因,该融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其中改造的乳酸杆菌信号肽基因通过连接短肽GSGGSGG与口蹄疫病毒VP1基因进行连接,连接后的基因序列再与免疫佐剂牛IL‑6基因序列进行融合。
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