[发明专利]一种基于酶催化反应测定过氧化氢的方法

摘要

本发明公开了一种基于酶催化反应测定过氧化氢的方法。在12支10mL比色管中都加入0.0～2.0mL pH=4.2克拉克‑鲁布斯缓冲液、0.1～1.5mL 0.05mol/L碘化钾和0.0～1.2mL 2.0×10‑6 mol/L牛血红蛋白，然后依次加入0.0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL 6.40×10‑5mol/L H2O2溶液，反应20分钟后，再在每支管中加入0.1～0.7mL 2.38×10‑4mol/L纳米银，用二次蒸馏水定容，继续反应10分钟后，用1cm石英比色皿，以λex=λem的方式扫描共振散射光谱；在430nm处分别测定加有H2O2溶液的散射强度I430nm和不加H2O2的试剂空白的散射强度I0，计算差值ΔI430nm=I0‑I430nm。另取池塘水或新鲜雨水过滤，同法测定其散射强度值，计算出池塘水或新鲜雨水中H2O2的含量。本发明测定方法选择性好、灵敏度高。

主权项

一种测定过氧化氢的方法，其特征在于具体步骤为：在12支10mL比色管中都加入0.0～2.0mL pH=4.2克拉克‑鲁布斯缓冲溶液、0.1～1.5mL 0.05mol/L碘化钾溶液和0.0～1.2mL 2.0×10‑6 mol/L牛血红蛋白溶液，然后在12支比色管中分别加入0.0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL 6.40×10‑5mol/L过氧化氢溶液，于室温下放置20分钟后，再在每支比色管中都加入0.1～0.7mL 2.38×10‑4mol/L纳米银即AgNPs溶液，用二次蒸馏水稀释至刻度，摇匀，继续反应10分钟后，用1cm石英比色皿于荧光分光光度计上以λex=λem的方式扫描共振散射光谱；在430nm波长处分别测定加有过氧化氢溶液的共振散射强度I430nm和不加过氧化氢的试剂空白溶液的共振散射强度I0，计算共振散射强度的差值ΔI430nm =I0‑I430nm，其共振散射强度的差值ΔI430nm与过氧化氢浓度c在3.20×10‑8～2.24×10‑5 mol/L范围内成线性关系，线性回归方程为△I=2.992×107c+37.82，相关系数0.9971，检出限2.20×10‑8 mol/L；另取池塘水或新鲜雨水过滤，取2 mL滤液同法测定共振散射强度值，计算出池塘水或新鲜雨水中过氧化氢的含量。