[发明专利]一种可用于微滴数字PCR的微滴制备方法有效
| 申请号： | 201510267209.9 | 申请日： | 2015-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN104846100B | 公开（公告）日： | 2017-10-10 |
| 发明（设计）人： | 冯继宏;童石渊;於然;白桦娟 | 申请（专利权）人： | 北京工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司11203 | 代理人： | 沈波 |
| 地址： | 100124 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种可用于微滴数字PCR的微滴制备方法，配制PCR水相，PCR水相包括上游引物、下游引物、PCR模板、PCRmix、以及双蒸水；将上述药品以此均匀混合，作为反应水相备用；将上游引物、下游引物、PCR模板、PCRmix依次均匀混合，滴加双蒸水后将溶液体系作为反应水相备用；配制PCR油相，将丙三醇、Trition X‑100、Tween‑80、壬基苯基醚IgelCO520依次均匀混合；取1体积水相PCR加到2体积的PCR油相中，涡旋搅拌并反应，得到油包水微滴；本发明提供的制备方法，可便捷地配制具有颗粒均匀、热力学性能稳定的油包水反应微滴，简便了微滴数字PCR实验的操作。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 数字 pcr 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种可用于微滴数字PCR的微滴制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤，S1配制PCR水相，PCR水相包括上游引物、下游引物、PCR模板、PCRmix、以及双蒸水；上述构成的配合比例关系为0.8‑1:0.8‑1:0.1‑0.2:10‑15:35‑40；将上游引物、下游引物、PCR模板、PCRmix依次均匀混合，滴加双蒸水后将溶液体系作为反应水相备用；S2配制PCR油相，将95％‑98％的丙三醇、0.1％‑0.5％的Triton X‑100、0.1％‑0.5％的Tween‑80、0.5％‑1％的聚氧代乙烯(5)任基苯基醚IgePalCO520依次均匀混合，获得的溶液作为反应油相备用；S3取1体积PCR水相加到2体积的PCR油相中，涡旋搅拌并反应，得到油包水微滴。
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