[发明专利]质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒

摘要

质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒本发明的课题是以高灵敏度检测基因启动子的活性。本实施方式中涉及的质粒型载体含基因启动子、第1基因、第2基因、内部核糖体结合序列、转录终止信号序列、及复制起始序列。第1基因编码配置在基因启动子之下游的，用于可视化基因启动子的活性的报告子蛋白质。第2基因编码配置在基因启动子之下游的复制起始蛋白质。内部核糖体结合序列配置在第1基因和第2基因之间。转录终止信号序列编码用于终止第1基因和第2基因的转录的信号。复制起始序列被复制起始蛋白质识别。

主权项

不以获得下述细胞的主体的疾病诊断结果或健康状况为直接目的的、基因启动子活性的体外检测方法，所述方法具备：将下述的质粒型载体导入细胞，伴随上述质粒型载体中含有的基因启动子的活性而上述质粒型载体可扩增地，在上述细胞分裂增殖的条件下培养上述细胞，以及测定在上述培养的细胞内的，上述质粒型载体中含有的报告子基因的表达量，所述质粒型载体，其具备：基因启动子、以及第1基因，其编码配置在上述基因启动子之下游的，用于可视化上述基因启动子的活性的报告子蛋白质、以及第2基因，其编码配置在上述基因启动子之下游的复制起始蛋白质、以及内部核糖体结合序列，其配置在上述第1基因和上述第2基因之间、以及转录终止信号序列，其编码用于终止上述第1基因和上述第2基因的转录的信号、以及复制起始序列，其被上述复制起始蛋白质识别，且将所述第1基因、第2基因构成双顺反子，由同一所述基因启动子启动，以使报告子基因和内部核糖体结合序列与复制起始蛋白质基因被转录成单一的mRNA。