[发明专利]一种杜鹃花化学消毒组培方法

摘要

本发明涉及一种杜鹃花化学消毒组培方法。杜鹃花的化学消毒组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、诱导培养、增殖培养、生根培养和瓶苗移栽。本发明的杜鹃花化学消毒组培方法，利用化学试剂达到灭菌或抑菌的目的，在配制培养基的过程中，培养容器和培养基都无需高温高压灭菌，减少了工作量和能源消耗，简化了杜鹃花组培环节；并且操作简单，只要按不同的培养基配方配制即可；实用性强，推广性好，还可以有效降低杜鹃花的组培成本，一般可降低成本10％以上。

主权项

一种杜鹃花化学消毒组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、诱导培养、增殖培养、生根培养和瓶苗移栽，其特征在于：(1)培养容器消毒：将培养瓶瓶盖及接种用的不锈钢盘在100mg/L次氯酸钠+2mg/L青霉素+100mg/L丙酸钙的水溶液中浸泡不少于10h，保存备用；(2)培养基配制：诱导培养基为ER+6～15mg/L ZT+5～15mg/L IAA+40～100mg/L次氯酸钠+2～5mg/L青霉素+50～100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；增殖培养基为：ER+1～3mg/L ZT+0.5～1.0mg/L IAA+40～100mg/L次氯酸钠+2～5mg/L青霉素+50～100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；生根培养基为1/2ER+0.5～1.5mg/L NAA+0.1～0.5IBA mg/L+40～100mg/L次氯酸钠+2～5mg/L青霉素+50～100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；所述ER为1965年，Eriksson公开的ER培养基；所述ZT为玉米素；所述NAA为〆‑萘乙酸；所述IAA为吲哚乙酸；所述IBA为吲哚丁酸；配制培养基时，先称各培养基配方中蔗糖和琼脂粉，加培养基总体积1/2的自来水，加热至琼脂粉完全溶解，再按各培养基配方配齐其他原料后，定容，然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8，分装到消毒过的培养容器中，封口，冷却凝固后备用；(3)诱导培养：取健壮的杜鹃花蕾，先自来水冲洗表面灰尘，剥去外苞片，用体积比为75％酒精中浸2～3s，再用重量比为0.1％HgCl2消毒6～10min，无菌水冲洗3～5次；在超净工作台上，剥去2～3层的苞片，切除基部褐化部分，接种到诱导培养基上，40d后形成若干小芽；培养室温度为25～28℃，光照12h，光照强度为1200～1500lx；(4)增殖培养：将诱导培养的小芽转入增殖培养基中,30d后逐步诱导出丛生芽并发育成不具根的丛生芽苗；将丛生芽苗切成带芽的茎段，转接到新的增殖培养基中，每30d转接一次；培养室温度为25～28℃，光照12h，光照强度为1200～1500lx；(5)生根培养：当增殖培养的丛生芽苗长到4～6cm时，将丛生芽苗切成单株，接种到生根培养基上，25d后形成完整植株；培养室温度为25～28℃，光照12h，光照强度为1200～1500lx；(6)瓶苗移栽：将生根培养获得的完整植株取出，洗净根部的培养基，用800倍的多菌灵浸泡30min后，移栽至栽培基质中，所述栽培基质由泥碳土和珍珠岩组成，其重量比为2∶1；大棚上层用75％遮光网遮盖，移栽的环境温度为22～28℃。