[发明专利]蜘蛛牵引丝蛋白优化表达方法在审
| 申请号： | 201510276014.0 | 申请日： | 2015-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN104946710A | 公开（公告）日： | 2015-09-30 |
| 发明（设计）人： | 夏小霞;杨雁祥;钱志刚;钟建江 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王毓理;王锡麟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种生物工程领域的蜘蛛牵引丝蛋白优化表达方法，该方法首先在大肠杆菌中构建高分子量重组蜘蛛牵引丝蛋白质粒并表达生产，在蛋白表达生产过程中通过降低培养温度提高蛋白产量；随后在发酵罐的水平上结合高密度发酵和降低培养温度的策略，实现了细胞量和表达水平的双重提高。本发明能够有效克服高度重复的重组蜘蛛牵引丝蛋白在生产发酵过程中表达量低的缺陷；为蜘蛛丝蛋白及类似高度重复序列蛋白的发酵生产研究和应用提供了良好借鉴意义。 | ||
| 搜索关键词： | 蜘蛛 牵引 蛋白 优化 表达 方法 | ||
【主权项】：
一种蜘蛛牵引丝蛋白优化表达方法，其特征在于，在大肠杆菌中构建重组蜘蛛牵引丝蛋白质粒并表达生产获得工程菌，然后通过对工程菌进行低温表达生产的方式实现了细胞量和表达水平的双重提高，所述的低温培养具体是指：1)从冷冻状态下将工程菌接种至培养基中常温旋转培养，获得种子液；2)将种子液接种至培养基中进一步进行二级种子培养；3)随后向培养液中加入诱导剂，然后在4～25℃环境下进行低温培养。
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