[发明专利]小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3电转染的方法在审
| 申请号： | 201510280081.X | 申请日： | 2015-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN104975045A | 公开（公告）日： | 2015-10-14 |
| 发明（设计）人： | 周磊;邹知明;崔涵;李一星 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530004 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3电转染的方法，该法主要采用等渗透压的电转染缓冲液，对小鼠成纤维细胞NIH/3T3进行一次放电，通过等渗透压和高压脉冲电场压组合，使得细胞体积增大，高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA通过膜上形成的小孔导入细胞质中，从而提高电转效率。实际试验表明，应用本发明质粒pmaxGFP(绿色荧光蛋白)转染到小鼠成纤维细胞NIH/3T3，转染效率最高可以达到55％左右。本发明可以缩短试验周期，节约成本，减少繁琐的操作步骤，并且安全无害，为小鼠成纤维细胞NIH/3T3细胞系的后续研究提供了关键的技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 小鼠 胚胎 纤维 细胞 nih t3 转染 方法 | ||
【主权项】：
一种小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3电转染的方法，其特征在于采用等渗透压的电转染缓冲液，对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3进行一次放电；所述电转染缓冲液的渗透压为280mOsmol/kg，一次放电的电压为710～1100V，持续时间为45～75μs。
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