[发明专利]一种脑钠肽近红外荧光检测试剂盒及其用途

摘要

本发明公开了一种脑钠肽近红外荧光检测试剂盒及其用途。本发明提供一种脑钠肽近红外荧光检测试剂盒，包括位于背板上的试剂条，试剂条从加样端开始依次为样品垫、标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、包被有抗脑钠肽抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸。本发明所提供的检测试剂盒结合近红外荧光检测技术，可快速，准确的检测出人全血、血清或血浆中的脑钠肽。

主权项

1.一种脑钠肽近红外荧光检测试剂盒，包括位于背板上的试剂条，试剂条从加样端开始依次为样品垫、标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、包被有抗脑钠肽单克隆抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸，所述免疫荧光探针为抗脑钠肽单克隆抗体包被的近红外荧光乳胶微球颗粒；所述脑钠肽近红外荧光检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：1)用0.01mol/L，PH7.3±0.05的磷酸盐缓冲液将荧光乳胶微粒离心清洗并将乳胶颗粒分散，在清洗好的乳胶颗粒分散液中加入Anti‑BNP抗体[EP3737(2)]‑C‑terminal；加入EDCA使抗体与颗粒偶联；再加入封闭液封闭乳胶颗粒上多余的基团，并加入冠醚，制备获得探针溶液；其中，按每毫克微球乳胶100微克的待标记抗体、100微克的EDCA用量标记；2)0.01M pH7.2的PBS缓冲液稀释Anti‑BNP抗体[EPR3735]至浓度2.0mg/ml，并加入冠醚，冠醚的终浓度为6mg/ml，将含有抗脑钠肽单克隆抗体的缓冲溶液喷加到硝酸纤维素膜上，按1ul/cm的量进行喷膜，37℃烘箱烘干备用；3)将步骤1制备获得的探针溶液浸润玻璃纤维薄膜，干燥备用；4)将步骤2所得的硝酸纤维素膜、步骤3所得的标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、样品垫、吸水纸及背板组装制备成脑钠肽近红外荧光检测试剂盒；所述步骤2中，含有抗脑钠肽单克隆抗体的缓冲溶液中还含有冠醚；所述冠醚选自二环已基‑18‑冠‑6；所述荧光乳胶微球颗粒的直径为140‑160nm；所述硝酸纤维素膜上包被的抗脑钠肽单克隆抗体和所述近红外荧光乳胶微球颗粒上包被的抗脑钠肽单克隆抗体为相同的抗脑钠肽单克隆抗体或不同的抗脑钠肽单克隆抗体。