[发明专利]一种用于荧光成像靶向纳米探针的制备方法

摘要

本发明主要涉及肿瘤检测领域，具体是一种检测肿瘤纳米探针的制备方法。改方法包括以下步骤：(1)一种氨基化叶酸的制备；(2)叶酸修饰的维他命E聚乙二醇琥珀酸酯的制备；(3)一种利用维他命E聚乙二醇琥珀酸酯与叶酸修饰的维他命E聚乙二醇琥珀酸酯制备新型荧光探针。此方法具有对设备要求低，操作简单，制作周期短等优点。该方法制备出具有荧光及肿瘤靶向功能的双功能纳米探针，这种双功能纳米探针能够用于肿瘤细胞或活体的肿瘤靶向的荧光成像检测。

主权项

用于荧光成像的靶向纳米探针的制备方法，其特征在于在维他命E聚乙二醇琥珀酸酯的端头羟基共价连接了一个叶酸分子，通过薄膜水化法制备了一种基于发光羟基磷灰石的靶向纳米探针，包括以下步骤：步骤1、一种氨基化叶酸的制备：1)称取叶酸溶于二甲基亚砜，置于圆底烧瓶，备用；2)称取N‑羟基琥珀酰亚胺和N，N’‑二环己基碳二亚胺溶于二甲基亚砜中，备用；3)将步骤2)处理好的混合溶液与步骤1)处理的溶液混合均匀后，加热反应；4)将步骤3)处理好的溶液过滤，除去反应副产物；5)将步骤4)处理好的滤液与乙二胺混合后，加热反应；6)用大量乙腈将步骤5)中的氨基化叶酸沉淀出来；7)用离心方法将氨基化叶酸收集起来，备用；步骤2、叶酸修饰的维他命E聚乙二醇琥珀酸酯的制备：1)称取维他命E聚乙二醇琥珀酸酯溶解于二甲基亚砜中，置于圆底烧瓶，备用；2)称取N，N’‑二环己基碳二亚胺和戊二酸溶于二甲基亚砜，备用；3)将步骤2)处理好的混合溶液与步骤1)处理的溶液混合后，加热反应；4)将步骤3)反应好的溶液过滤，除去反应副产物，并将滤液转移进入透析袋，以二甲基亚砜为透析液，透析除去反应剩余戊二酸；5)将步骤4)处理后的溶液与氨基化叶酸溶液混合，加热反应；6)将步骤5)反应好的溶液转移进透析袋，透析除去剩余氨基化叶酸以及二甲基亚砜；7)将步骤6)处理好的样品冷冻干燥，得到叶酸修饰的维他命E聚乙二醇琥珀酸酯；步骤3、一种利用维他命E聚乙二醇琥珀酸酯与叶酸修饰的维他命E聚乙二醇琥珀酸酯制备新型荧光探针的方法，其步骤是：1)称取维他命E聚乙二醇琥珀酸酯与叶酸修饰的维他命聚乙二醇琥珀酸酯溶于二氯亚砜中，备用；2)称取掺稀土元素发光羟基磷灰石溶于二氯亚砜中，备用；3)将步骤1)与步骤2)处理好的溶液混合，备用；4)将步骤3)处理好的溶液置于旋转蒸发仪，将混合溶液中的二氯亚砜蒸出；5)向步骤4)处理好的样品中加入去离子水，搅拌；6)将步骤5)处理好的样品冷冻干燥，制成用于荧光成像的靶向探针；所制得的靶向探针具有较好的荧光特性及肿瘤靶向的特点。