[发明专利]用银纹夜蛾幼虫繁殖蜡蚧轮枝菌恢复其活力的方法

摘要

用银纹夜蛾幼虫繁殖蜡蚧轮枝菌恢复其活力的方法，属生物技术。饲养银纹夜蛾；培养蜡蚧轮枝菌；制备蜡蚧轮枝菌的分生孢子液；将制备的分生孢子液制成悬浮液；将悬浮液均匀喷于银纹夜蛾幼虫体至体表面湿润，再把幼虫放入无菌人工气候室内饲养至虫体长满菌丝；收集上步的虫体，脱水干燥，贮存于－78℃～－95℃的冰箱。经过本发明技术繁殖的蜡蚧轮枝菌，繁殖续代过程中能够长时间保持菌株孢子活力及其感染能力，也可利用该方法对感染力及活力严重下降的菌株进行活力及感染能力恢复。

主权项

一种用银纹夜蛾幼虫繁殖蜡蚧轮枝菌恢复其活力的方法，其特征在于按如下步骤：一、饲养银纹夜蛾；二、制备蜡蚧轮枝菌菌种：(1)、培养蜡蚧轮枝菌：将蜡蚧轮枝菌KMZW－1菌株接种到PDA培养基上，放入25±0.5℃的恒温培养箱培养8～10天；(2)、制备蜡蚧轮枝菌的分生孢子液：取在PDA培养基上长好的KMZW－1菌落，用无菌水将孢子洗下并过滤，定量滤液内蜡蚧轮枝菌的分生孢子数到100～120孢子/ml，得到分生孢子液；(3)、接种及繁育：A、将制备的分生孢子液加入占其重量1％～5％的吐温－80和5％～12％的甘油，于20℃～35℃下制成悬浮液；B、将悬浮液均匀喷于银纹夜蛾幼虫体表至体表面湿润，再把幼虫放入无菌人工气候室内，于24～26℃、不低于RH85％、光照L∶D＝16h∶8h的条件下，饲养银纹夜蛾9－15天至虫体长满菌丝；C、收集上步的虫体，于4℃～10℃的密闭环境下，使用干燥剂进行脱水干燥，干燥至虫体水分含量≤12％，将干燥后的虫体贮存于－78℃～－95℃的冰箱。