[发明专利]基于毒蛋白MazF反向筛选的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌的构建方法在审
| 申请号： | 201510294606.5 | 申请日： | 2015-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN104962508A | 公开（公告）日： | 2015-10-07 |
| 发明（设计）人： | 江波;沐万孟;何伟伟;张涛 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/61;C12N15/75;C12P19/02;C12R1/125 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 时旭丹;张仕婷 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 基于毒蛋白MazF反向筛选的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌的构建方法，属于酶基因工程技术领域。利用载体pDGREF将毒蛋白MazF基因和抗生素抗性基因spc整合至B.subtilis 1A751染色体上，得到1A751/REF；以pDGIEF为出发载体，将梭状芽胞杆菌ATCC 35704的DPE酶基因和启动子P43构建至淀粉酶同源臂之间，得到整合载体pDGI-P43-DPE；将pDGI-P43-DPE转化至1A751/REF感受态中，在淀粉酶同源臂作用下，P43-DPE酶基因整合至1A751/REF染色体上毒蛋白MazF的位置，得到一株食品级安全的产D-阿洛酮糖3-差向异构酶重组枯草芽孢杆菌1A751-DPE，命名为枯草芽孢杆菌SK38.003，保藏号CCTCC NO: M 2015259。发酵液总酶活达到6U/mL，具有重要的工业应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 蛋白 mazf 反向 筛选 表达 阿洛酮糖 差向异构 重组 枯草 芽孢 杆菌 构建 方法 | ||
【主权项】：
一株基于毒蛋白MazF反向筛选的表达D‑阿洛酮糖 3‑差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌，其组成为1A751‑DPE，分类命名为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）SK38.003，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 2015259。
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