[发明专利]一种鹿真皮毛乳头细胞的体外分离培养方法及应用有效
| 申请号： | 201510309833.0 | 申请日： | 2015-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN104911142B | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 孙红梅;李春义;褚文辉;路晓;赵海平 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院特产研究所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 130112 吉林省长*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鹿真皮毛乳头细胞的体外分离培养方法及应用，属于细胞生物学技术领域。本发明所提供的方法为在体式显微镜下分离鹿皮中的完整毛囊，然后用胶原酶消化毛囊，切下含毛乳头的毛囊球部，剥离毛根鞘，获得毛乳头，收集毛乳头，再用胶原酶消化基底膜，培养后获得毛乳头细胞。本发明方法培养成功率非常高，并且显著提高了毛乳头的贴壁率和细胞产量。利用本发明培养方法可以在4小时左右获得较纯的真皮毛乳头100个左右，将毛乳头进行接种培养7天左右即可获得大量的毛乳头细胞，适用于鹿真皮毛乳头细胞的体外分离培养。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 皮毛 乳头 细胞 体外 分离 培养 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种鹿真皮毛乳头细胞的体外分离培养方法，其特征在于，步骤如下：1)利用体式显微镜分离鹿皮肤中的毛囊，获得完整毛囊；2)利用Ⅱ型胶原酶消化步骤1)所得的完整毛囊，消化条件为37℃消化30min，切下含毛乳头的毛囊球部，剥离毛根鞘，获得毛乳头；3)收集步骤2)中所得的毛乳头，再用Ⅳ型胶原酶消化基底膜，消化条件为37℃消化15～20min，然后利用DMEM+15％FBS培养基进行培养，获得毛乳头细胞。
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