[发明专利]利用级联的DNA链替换反应的细胞内非编码RNA检测方法有效
申请号: | 201510319343.9 | 申请日: | 2015-06-10 |
公开(公告)号: | CN104962555B | 公开(公告)日: | 2019-04-05 |
发明(设计)人: | 梁好均;王晓静;宋廷结 | 申请(专利权)人: | 中国科学技术大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6886 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 王旭 |
地址: | 230026 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用级联的DNA链替换反应的细胞内非编码RNA检测方法,其是一种新型的细胞内非编码RNA,尤其是microRNA(miRNA)的检测方法。其特征在于合理设计DNA分子探针,使细胞内的目标链能够触发级联的DNA链替换反应的发生,进而有效的释放具有荧光基团修饰的信号链,通过荧光显微镜观察肿瘤细胞的成像,最终实现基于级联的DNA链替换反应的细胞内miRNA检测。本发明具有操作简单,高效率的特点,同时也是在细胞内miRNA检测中一种新型方法。 | ||
搜索关键词: | 利用 级联 dna 替换 反应 细胞内 编码 rna 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于检测miRNA分子的DNA分子探针组合,所述DNA分子探针组合包括由信号链和基底链按照1:1的比例杂交而成的双链DNA寡核苷酸和作为单链DNA寡核苷酸的燃料链两部分,所述信号链的一端带有荧光基团修饰,所述基底链的一端修饰有淬灭基团,在杂交后信号链上的荧光基团与基底链上的淬灭基团靠近以致所述荧光基团被淬灭,并且所述miRNA分子为miRNA‑21,所述基底链序列如SEQ ID NO:1所示,所述信号链的序列如SEQ ID NO:2所示,并且所述燃料链的序列如SEQ ID NO:3所示,或者所述miRNA分子为miRNA‑122,所述基底链的序列如SEQ ID NO:4所示,所述信号链的序列如SEQ ID NO:5所示,并且所述燃料链的序列如SEQ ID NO:6所示。
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