[发明专利]一种α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备方法

摘要

本发明涉及到一种α‑葡萄糖苷酶抑制剂的制备方法，其特征在于包括下述步骤：羊栖菜粉末在循环超声仪中加入蒸馏水超声提取，然后离心，取上清液，真空旋转蒸发浓缩至原体积的五分之一，加入无水乙醇使溶液中静置、离心，取沉淀物真空下冷冻干燥；将冷冻干燥后的沉淀物溶于水中，配成上样液，将上样液注入到D311大孔树脂中吸附，去除蛋白质和色素，得到第一洗脱液；将得到的第一洗脱液在DEAE‑52阴离子交换纤维柱进行吸附洗脱，使用NaCl浓度为0‑3M的NaCl‑Tris‑HCl缓冲液体系等梯度洗脱；在波长为215nm收集到0.5M‑1M NaCl下的洗脱液，在3.5KD切向流超滤膜下膜浓缩脱盐至原体积的五分之一，真空冷冻干燥即得到α‑葡萄糖苷酶抑制剂。

主权项

1.一种α‑葡萄糖苷酶抑制剂的制备方法，其特征在于包括下述步骤：羊栖菜粉末在循环超声仪中加入蒸馏水超声提取，超声时间为12‑18min，超声温度为55‑65℃，羊栖菜粉末与蒸馏水的比例为1:15‑25 g/ml，功率900‑1100W；然后在离心机中9500‑10500rpm下离心，取上清液，55‑65℃下真空旋转蒸发浓缩至原体积的五分之一，加入无水乙醇使溶液中醇量达60‑70wt%，静置22‑26小时，在4500‑5500rpm下离心12‑18min，取沉淀物；将沉淀物在真空下冷冻干燥，真空冷冻条件为：真空度125‑135Pa，温度为‑85~‑75℃，时间为46‑50h；将冷冻干燥后的沉淀物溶于水中，配成浓度为0.9‑1.1wt%的水溶液作为上样液，将上样液注入到D311大孔树脂中吸附，去除蛋白质和色素，得到第一洗脱液；上样液与大孔树脂用量体积比为1:1；将得到的第一洗脱液在DEAE‑52阴离子交换纤维柱进行吸附洗脱，洗脱所使用的缓冲体系为NaCl‑Tris‑HCl缓冲液，pH为7.0‑7.2；用含NaCl 0‑3M的缓冲液等梯度洗脱DEAE‑52阴离子交换纤维柱，流速为1mL/min；在波长为215nm收集到0.5M ‑1M NaCl下的洗脱液，在3.5KD切向流超滤膜下膜浓缩脱盐至原体积的五分之一，在125‑135Pa、温度‑85~‑75℃下真空冷冻干燥46‑50h，即得到α‑葡萄糖苷酶抑制剂。