[发明专利]一种多重聚合酶链式反应方法及其应用

摘要

本发明涉及一种多重聚合酶链式反应方法及其应用，具体地所述多重聚合酶链式反应方法包括如下步骤：1)提供一聚合酶链式反应体系，所述反应体系包含待扩增的模板、用于扩增的引物对、dNTP底物、聚合酶、用于进行聚合酶链式反应所需的试剂和PCR增强剂；2)对步骤1)的聚合酶链式反应体系进行聚合酶链式反应；和3)任选地，对步骤2)所得反应混合物进行电泳和/或测序检测，其中，所述的用于扩增的引物对包括3‑30个引物对。本发明还公开了所述方法的应用。使用本发明方法可在极低的引物对浓度下实现对极低浓度模板(尤其是复杂模板)的高灵敏度高特异性扩增。

主权项

一种多重聚合酶链式反应方法，其特征在于，包括如下步骤：1)提供一聚合酶链式反应体系，所述反应体系包含待扩增的模板、用于扩增的引物对、dNTP底物、聚合酶、用于进行聚合酶链式反应所需的试剂和PCR增强剂，其中所述PCR增强剂选自下组：纳米金、纳米银、量子点、纳米多聚物、碳纳米管、石墨烯、或其组合；且所述聚合酶链式反应体系具有选自下组的一个或多个特征：a)所述用于扩增的引物对的单引物终浓度为0.05‑2pmol/25μL，且所述待扩增的模板选自下组：人类基因组模板、λDNA、质粒；b)所述用于扩增的引物对的单引物终浓度为2‑25pmol/25μL，且所述待扩增的模板为人类基因组模板；2)对步骤1)的聚合酶链式反应体系进行聚合酶链式反应，从而获得含扩增产物的反应混合物，其中扩增产物包括分别对应于所述引物对的各扩增产物；和3)任选地，对步骤2)所得反应混合物进行电泳和/或测序检测；其中，所述聚合酶链式反应体系含有n个用于扩增的引物对，所述n为3‑30的整数。