[发明专利]一种乳酸脱氢酶同工酶1的检测试剂及其检测方法有效
申请号: | 201510337664.1 | 申请日: | 2015-06-17 |
公开(公告)号: | CN104931448B | 公开(公告)日: | 2018-01-30 |
发明(设计)人: | 陈锡良;张学德;罗维晓;谭柏清 | 申请(专利权)人: | 陈锡良 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所37218 | 代理人: | 李桂存 |
地址: | 250200 山东省济南*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用化学抑制法来检测乳酸脱氢酶同工酶1的检测试剂。本试剂包括试剂R1和试剂R2,其特征在于,所述试剂R1包含生物缓冲液其中溶质在试剂R1中的浓度为50‑150mmol/L,L‑乳酸锂1.0‑1.5mmol/L,过氯酸钠1.5‑2.5mol/L,羟基乙叉二膦酸1‑5 ml/L,十八烷基三甲基溴化铵0.1‑1g/L,聚氧乙烯烷基醚0.1‑1 ml/L,防腐剂0.5‑5ml/L;所述试剂R2包含缓冲液其中溶质在试剂R1中的浓度为50‑150mmol/L,NAD+8‑12mmol/L,防腐剂0.5‑5 ml/L。本乳酸脱氢酶同工酶1的检测试剂具有准确度高、价格低廉的优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 乳酸 脱氢酶 检测 试剂 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种检测乳酸脱氢酶同工酶1的检测方法,其特征在于,包含如下步骤:(1)配制试剂R1,包含:生物缓冲液 其中溶质在试剂R1中的浓度为50‑150mmol/L,生物缓冲液为CAPS缓冲液,L‑乳酸锂 1.0‑1.5mmol/L,过氯酸钠 1.5‑2.5mol/L,羟基乙叉二膦酸 1‑5 ml/L,十八烷基三甲基溴化铵 0.1‑1g/L,聚氧乙烯烷基醚 0.1‑1 ml/L,防腐剂 0.5‑5ml/L;还包括:抗坏血酸氧化酶 1‑5KU/L,和/或 胆红素氧化酶 1‑3KU/L。(2)配制试剂R2,包含:缓冲液 其中溶质在试剂R2中的浓度为50‑150mmol/L,所述试剂R2中缓冲液为酒石酸缓冲液,NAD+ 8‑12mmol/L,防腐剂 0.5‑5 ml/L;还包括:明胶 1‑5 g/L;(3)量取试剂R1和试剂R2,分别为250μL和50μL ;(4)将待测血清5μL与试剂R1混合,测得波长为340nm时的吸光度A1;(5)将试剂R2加入步骤(4)的混合溶液内,3‑8min后,测得波长为340nm时的吸光度A2,计算其差值∆A测定;(6)采用以上步骤测量标准品的∆A标准;(7)按以下公式计算乳酸脱氢酶同工酶1含量:乳酸脱氢酶同工酶1含量(U/L)=(∆A测定÷∆A标准)×C标准。
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