[发明专利]一种鉴定牦牛肉真伪的检测方法

摘要

本发明公开了一种鉴定牦牛肉真伪的检测方法，本发明的引物是针对牦牛物种的特异性基因序列进行设计，扩增片段长度1003bp，而其它肉品不能扩增出该片段。通过采用DNA 提取，PCR扩增，电泳检测和结果鉴定几个步骤即可进行牦牛肉的鉴定，不需要进行酶切和测序。本发明操作方便，检测时间短，具有很好的应用前景，能够满足市场监督检测的需要。

主权项

一种能快速鉴定出牦牛肉真伪的检测方法，其特征在于： 步骤一、 DNA 提取：将新鲜的动物肌肉组织取下一小块，切碎后放入研钵中加入液氮，快速将组织在液氮中捣碎并研磨成细粉；取0.6g细粉于2ml的EP管中，加入TE缓冲液共480µL，放入68℃水浴10 min，加入53µL的10％SDS，10µL的10mg/mL的蛋白酶K，68℃水浴15 min，取出后加入87µL的5 mol/L NaCl，以及70µL的CTAB/NaCl，68℃水浴15min，‑20℃放置30 min，取出加入等体积的24：1的氯仿／异戊醇混匀，离心取上清；重复上述步骤一次；最后用2倍体积的冰的无水乙醇混匀，‑20℃静置30 min，离心去上清，沉淀用70％的乙醇洗涤，干燥，沉淀溶于50µL双蒸水中，使用超微量核酸蛋白质测定仪，将 DNA 浓度稀释至 100ng/μL 左右作为模板。