[发明专利]一种大量分离天然甜味剂三叶苷的方法

摘要

本发明提供了一种大量分离天然甜味剂三叶苷的方法，通过将粉碎后的三叶苷原料以固液质量比110～50加入体积分数为30～90％的乙醇，加热回流分离，分离液过滤，分离出滤渣和滤液，将滤液减压浓缩至无醇味，得分离物；将分离物加水溶解，并用乙酸乙酯萃取，萃取液减压浓缩得乙酸乙酯浸膏；将乙酸乙酯浸膏采用高速逆流色谱法分离，得到天然甜味剂。本发明分离方法简便、快捷，分离周期短，单体制备量大，且单体具有多种药理活性。

主权项

一种大量分离天然甜味剂三叶苷的方法，其特征在于，按照以下步骤进行：(1)将粉碎后的三叶苷原料以固液质量比1：10～50加入体积分数为30～90％的乙醇，加热回流分离，回流提取2‑4h，分离液过滤，分离出滤渣和滤液；(2)将滤渣按步骤(1)所述分离方法重复分离2次，合并滤液，减压浓缩至无醇味，得分离物；(3)将1质量份步骤(2)中的分离物加入100质量份水溶解，并用乙酸乙酯萃取，萃取3次，萃取液减压浓缩得乙酸乙酯浸膏；(4)A.溶剂系统和样品溶液的配置：将所述步骤(3)中的乙酸乙酯浸膏采用高速逆流色谱法分离得到天然甜味剂；其中，高速逆流色谱法中的溶剂系统由正己烷、乙酸乙酯、乙醇和水按体积比1：6：2～3：6组成，振摇30s后在室温下静置过夜；在分液漏斗中配置，使用前分别取分液漏斗中的上相为固定相，下相为流动相，超声脱气30分钟；取步骤(2)中的乙酸乙酯萃取物，用相同体积的上相和下相溶解样品，备用；B.高速逆流色谱分离制备过程：先将溶剂系统的上相注入高速逆流色谱仪分离管中，待上相充满整个管路后调整主机转速750‑850rpm/min，再以1.5‑2.5ml/min流速泵入下相，待流动相从柱出口流出，两相在分离管中达到动态平衡后，由进样阀注入样品溶液，在280nm波长下检测，记录色谱图，根据色谱图收集三叶苷流分；所述三叶苷原料为多穗柯甜茶叶。