[发明专利]一种乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母及其构建方法在审
申请号: | 201510369294.X | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN104911118A | 公开(公告)日: | 2015-09-16 |
发明(设计)人: | 高晓冬;中西秀树;李子杰 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/53;C12N9/04;C12R1/865 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母及其构建方法,属于微生物技术领域和分子生物学技术领域。本发明采用基因同源重组的方法将酿酒酵母编码PDC的基因PDC1,PDC5和PDC6敲除掉,在酿酒酵母中表达来源于人的LDH并用抗霉素A来阻断电子链传递,使得人源化的乳酸发酵来代替乙醇发酵来维持糖酵解的进行。本发明顺利实现了人的乳酸脱氢酶的异源表达。本发明得到的乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母能够表达人的乳酸脱氢酶,在酿酒酵母pdc1Δ pdc6Δ pdc5Δ三缺陷菌株中表达LDHA或LDHC,加入抗霉素A后,能够生长并检测到乳酸的产生。本发明的乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母将可以作为一种潜在的筛选抗癌药物以及能够调节乳酸脱氢酶活性相关基因的工具。 | ||
搜索关键词: | 一种 乳酸 脱氢酶 人源化 酿酒 酵母 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母,其特征在于,所述酿酒酵母缺失了丙酮酸脱羧酶基因,且表达人的乳酸脱氢酶。
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