[发明专利]一种高产吲哚乙酸巴西固氮螺菌R的发酵培养基及其应用

摘要

本发明涉及高产吲哚乙酸巴西固氮螺菌R的发酵培养基及其应用，可有效解决高产吲哚乙酸巴西固氮螺菌R的发酵培养基，提高吲哚乙酸产出的问题，方法是，由以下重量百分比计的：果糖0.1～1%、氮源0.5～2%、NaCL 0.1～1.0%、CuSO4 0.01～0.05%、色氨酸0.01～0.15%和余量为水制成，先将色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm滤膜过滤除菌，成质量浓度为10.2115%色氨酸溶液；再将果糖、氮源、NaCL和CuSO4用水溶解，121℃灭菌25min，冷却至室温，然后加入色氨酸溶液混匀，用盐酸或NaOH调pH为8.0～10.0；本发明提供发酵培养基及培养条件简单，操作方便，生产成本低，吲哚乙酸产量高，易于工业化生产，节能环保，经济和社会效益巨大。

主权项

1.一种巴西固氮螺菌R的发酵培养基在高产吲哚乙酸中的应用，方法是：（1）、菌种的活化：挑取巴西固氮螺菌R斜面菌种，在LB培养基平板上三区划线，置 30℃培养箱中培养24～48h，得活化菌种；（2）、巴西固氮螺菌R种子液的制备：挑取一环活化菌种接种于LB液体培养基中，置 30 ℃180 r/min摇床培养24～48 h，制得巴西固氮螺菌R种子液；（3）、接种发酵培养：按接种量为1～5%接种巴西固氮螺菌R种子液于高产吲哚乙酸的发酵培养基中，在培养温度为30～40℃的条件下，160～200 r/min摇床培养2～6d，即可得到含吲哚乙酸363.6～649.84mg/L的发酵液；所述的高产吲哚乙酸巴西固氮螺菌R的发酵培养基是，由以下重量百分比计的：果糖0.1～1%、氮源0.5～2%、NaCL 0.1～1.0%、CuSO4 0.01～0.05%、色氨酸0.01～0.15%和余量为水制成，其中，先将色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm滤膜过滤除菌，成质量浓度为10.2115%色氨酸溶液；再将果糖、氮源、NaCL和CuSO4用水溶解，121℃灭菌25min，冷却至室温，然后加入色氨酸溶液混匀，用盐酸或NaOH调pH为8.0～10.0；所述的巴西固氮螺菌R，分类命名为巴西固氮螺菌（Azospirillum brasilense），2012年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC NO 6029，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；所述的氮源为豆粕粉或大豆粉，豆粕粉为大豆榨油后的一级压榨豆粕粉，大豆粉为黄豆粉；所述的水为蒸馏水或纯净水。