[发明专利]一种用于SAM检测的酶电极传感器的制备及应用

摘要

本发明公开了一种用于SAM检测的酶电极传感器的制备及应用，其特征是（1）将玻碳电极，用Al2O3粉抛光，并在超声清洗仪中先后用乙醇、水超声清洗，得到活化玻碳电极；（2）将活化玻碳电极采用电化学聚合法制备聚3,7‑二氨基吩噻嗪‑5‑翁修饰电极；（3）再将聚3,7‑二氨基吩噻嗪‑5‑翁修饰电极交联方法固定甲基转移酶，得到固定甲基转移酶电极传感器。用该电极快速检测样品中SAM，该方法灵敏度高、选择性好、响应时间短、干扰少，优于其它检测方法，是一种简单快速、方便易行的SAM测定方法，本申请制备的固定甲基转移酶电极传感器成本低、制备工艺简单，特异性好，具有实现自动化现场测定的潜力。

主权项

一种固甲基转移酶电极传感器的制备方法，其特征在于，该方法具有以下工艺步骤：(1)电极活化处理：将玻碳电极，依次用0.3μm、0.05μm的Al2O3粉抛光，并在超声清洗仪中先后用乙醇、水超声清洗10min，以清洗后的玻碳电极做为工作电极，于0.5mol L‑1的硫酸溶液中于‑0.3到+1.5V电位范围内进行扫描至稳定，得到活化玻碳电极；(2)聚3,7‑二氨基吩噻嗪‑5‑翁修饰电极制备：将含有0.11～0.15mol L‑1的3,7‑二氨基吩噻嗪‑5‑翁的pH值为7.0～7.2磷酸盐缓冲溶液通入氮气除氧10min，除氧后，将活化玻碳电极放入，采用计时电流法在电压为1.5V下预阳极化240～280s，再采用循环伏安扫描80圈，得到聚3,7‑二氨基吩噻嗪‑5‑翁修饰电极；(3)甲基转移酶固定液的制备：在反应器中，按甲基转移酶与DNA质量比为1：1加入，甲基转移酶与DNA溶解在pH值为7.2的磷酸盐缓冲溶液中，溶液中含甲基转移酶与DNA的浓度都在12～15mg/mL范围内，该溶液为甲基转移酶固定液；(4)固定甲基转移酶电极传感器的制备方法：将步骤(2)制备的聚3,7‑二氨基吩噻嗪‑5‑翁修饰电极浸泡于步骤(3)制备的甲基转移酶固定液中8～10h，取出后，在5～8℃干燥，即得固定甲基转移酶电极传感器。