[发明专利]同时检测桔小实蝇两种内寄生蜂实时荧光定量PCR方法

摘要

本发明提供一种同时检测桔小实蝇两种内寄生蜂实时荧光定量PCR技术，包括了用于同时检测桔小实蝇两种内寄生蜂实时荧光定量PCR方法的引物和探针，提供的引物对与探针在实时荧光定量PCR仪中检测桔小实蝇体内中处于不同发育阶段的阿里山潜茧蜂和长尾潜蝇茧蜂基因。通过比较PCR扩增过程生成的扩增曲线（Ct值）和利用已经生成的标准基线或阈值线（标准曲线Ct值），从而达到定性检测桔小实蝇体内是否存在被寄生的阿里山潜蝇茧蜂和长尾潜蝇茧蜂的检测信号。该方法可应用检测该寄生蜂在桔小实蝇体内寄生的任意虫态，可广泛应用于室内繁蜂时寄生率的早期检测和野外放蜂后的效果评价，还可用于定性评价两种寄生蜂之间的竞争关系。

主权项

用于同时检测桔小实蝇两种内寄生蜂实时荧光定量PCR方法的探针，其特征在于：所述探针为：阿里山潜蝇茧蜂探针序列为5′‑NED‑AGTTGGGCATAGAGGTATAT‑MGB‑NFQ‑3′，长尾潜蝇茧蜂探针序列是5′‑VIC‑ACCCCCTATGACCT‑MGB‑NFQ‑3′，寄主害虫实蝇的探针序列5′‑FAM‑TGTAAGGGAAGGAGG‑MGB‑NFQ‑3′。