[发明专利]一种东稻4号快速遗传转化的方法在审
申请号: | 201510394306.4 | 申请日: | 2015-07-07 |
公开(公告)号: | CN105002211A | 公开(公告)日: | 2015-10-28 |
发明(设计)人: | 梁正伟;姜昌杰;李晓薇;魏立兴;吕丙盛;马红媛 | 申请(专利权)人: | 中国科学院东北地理与农业生态研究所 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 侯静 |
地址: | 150081 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种东稻4号快速遗传转化的方法,它涉及一种东稻4号快速遗传转化的方法。本发明的目的是要建立一种适宜“东稻4号”的转化系统,解决目前“东稻4号”遗传转化周期较长的问题,本发明步骤为:水稻胚性愈伤组织的诱导和预培养、农杆菌浸染和共培养、愈伤组织脱菌及筛选、抗性苗再生和移栽即完成。本发明大大缩短了水稻转基因周期,总计68-100d左右,比原有方法节省50-82d的时间。本发明应用于水稻育种领域。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种东稻4号快速遗传转化的方法,其特征在于该方法包括以下具体步骤:一、将东稻4号水稻种子脱颖壳,然后进行消毒再接种到水稻诱导培养基上;二、水稻胚性愈伤组织的诱导和预培养:在28℃全光照条件下,将步骤一接种后的水稻诱导培养3~4周,得水稻胚性愈伤组织;然后置于N6D培养基28℃光照预培养5d;三、农杆菌浸染和共培养:将预培养后的愈伤组织置于AAM重悬菌液中摇动90s后,置于3层无菌滤纸上,去除农杆菌菌液,然后将愈伤组织转入共培养基中,在黑暗的条件下共培养3d;四、愈伤组织脱菌及筛选:将共培养后的愈伤组织进行脱菌,然后在28℃全光照条件下,在选择培养基上筛选获得抗性愈伤组织;五、将抗性愈伤组织转移到分化培养基上,分化培养获得抗性植株;六、将抗性植株壮苗、炼苗、移栽,即完成东稻4号的遗传转化。
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