[发明专利]脂质体流感病毒抗原疫苗及其制备方法

摘要

本发明涉及一种脂质体流感病毒抗原疫苗及其制备方法，反相蒸发法制备脂质体流感病毒抗原疫苗，包括流感病毒抗原疫苗原液的制备，空脂质体的制备及脂质体的合成等步骤，通过本发明提供的脂质体流感病毒抗原疫苗制备方法所制得脂质体流感病毒抗原疫苗，相对于线性的表位疫苗，不仅可以同时携带多个或多种抗原，诱发多种细胞免疫反应并引起较强的免疫应答，而且脂质体疫苗性能较稳定，保存期较长，同时，可减少免疫原剂量的使用量。

主权项

一种脂质体流感病毒抗原疫苗的制备方法，其特征在于，采用反相蒸发法，包括以下步骤：(1)流感病毒抗原疫苗原液的制备：取任意一种或多种流感病毒毒株，分别将所述流感病毒毒株接种于病毒培养基上，在33℃～35℃的温度下培养48～72小时后，获得流感病毒体,经甲醛灭活,超滤浓缩、纳米对撞机裂解病毒及柱层析纯化后制成流感病毒抗原疫苗原液；(2)空脂质体的制备：将磷脂、胆固醇以及抗氧化剂混合溶于有机溶剂中，减压蒸发有机溶剂后，得到膜状的空脂质体；(3)单相分散体系的制备：向步骤(2)中获得的空脂质体中加入乙醚溶解膜状空脂质体形成双相分散体系，然后加入碱性缓冲液，在水浴型超声波处理器上超声至混合物形成单相分散体系；(4)成溶胶体系的制备：将步骤(3)中获得的混合物通过减压蒸发去除乙醚至凝胶形成，然后继续减压蒸发形成脂质体悬液，继续干燥去除乙醚，得到空脂质体，然后加入步骤(1)获得的流感病毒抗原疫苗原液，获得粗制脂质体；(5)高压匀浆将步骤(4)获得的粗制脂质体高压匀浆,除菌过滤即可。