[发明专利]一种红球菌株C3、含该菌株的微生物菌剂及其应用

摘要

本发明公开了一种红球菌株C3，该菌株制备步骤如下：按1％接种量吸取焦化厂废水生物处理系统的活性污泥样品至苯酚的新鲜富集培养基中振荡培养；富集瓶混浊后，取一定量的培养液转接到浓度增长的苯酚液体培养基中培养；依次类推，逐级提高苯酚浓度至1000mg/L；将经过富集培养基富集后的菌体转接苯酚浓度为1000mg/L无机盐培养基中驯化；采用稀释涂布和划线的方法，在分离培养基平板上分离筛选以苯酚为唯一碳源和能源的菌株；该菌株在LB固体培养基上划线分离单菌落，淡黄半透明，边缘整齐，质地湿润，易挑起；能以苯酚、吡啶、邻甲酚为碳源，其在无机盐液体培养基中能够降解1000mg/L苯酚。本发明还提供了一种以该红球菌株C3为活性组分的微生物菌剂及制备方法。

主权项

一株红球菌株C3，其特征在于，所述的菌株由下述步骤制备而得：按1％接种量吸取一定量的焦化厂废水生物处理系统的活性污泥样品至苯酚的新鲜富集培养基中振荡培养；富集瓶混浊后，取一定量的培养液转接到增长一定浓度的苯酚液体培养基中培养；依次类推，逐级提高苯酚浓度至1000mg/L；将经过苯酚浓度为1000mg/L的富集培养基富集后的菌体转接苯酚浓度为1000mg/L无机盐培养基中驯化；采用稀释涂布和划线的方法，在分离培养基平板上分离筛选以苯酚为唯一碳源和能源的菌株；所述液体富集培养基组分为蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、去离子水和苯酚，其中蛋白胨：牛肉膏：氯化钠：去离子水的质量比为10:3:5:1000，苯酚浓度根据需要添加；所述的无机盐液体培养基以苯酚为唯一碳源，组分及质量比为0.5KH₂PO₄：0.5K₂HPO₄：NH₄NO₃，0.2MgSO₄：0.2CaCl₂：0.01FeSO₄·7H₂O：0.01MnSO₄·H₂O，还包括苯酚，苯酚含量根据需要量加入，加蒸馏水定容；制备得到的菌株经16S rDNA鉴定为红球菌属Rhodococcus sp.，革兰氏染色呈阳性，脲酶、接触酶阳性，氧化酶、VP反应和甲基红反应阴性；在LB固体培养基上划线分离单菌落，淡黄半透明，边缘整齐，质地湿润，易挑起；所述的红球菌株C3能以苯酚、吡啶、邻甲酚为碳源，其在无机盐液体培养基中能够降解1000mg/L苯酚。