[发明专利]生物素链霉亲和素与电化学联用检测霉菌毒素的方法在审
申请号: | 201510400407.8 | 申请日: | 2015-07-06 |
公开(公告)号: | CN105158458A | 公开(公告)日: | 2015-12-16 |
发明(设计)人: | 方维焕;章先;李肖梁;王歆;孙孟娇;谢珲 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N33/535 | 分类号: | G01N33/535;G01N33/577 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 周世骏 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及生物工程领域,旨在提供一种生物素链霉亲和素与电化学联用检测霉菌毒素的方法。该方法是在常规间接竞争ELISA反应的基础上,选用生物素标记的霉菌毒素单克隆抗体,并用碱性磷酸酶标记的链霉亲和素代替传统的酶标抗体,借助生物素链霉亲和素信号放大系统提高检测的灵敏度;并选用硝基苯磷酸作为碱性磷酸酶的催化底物,利用其产物硝基苯酚具有与硝基苯磷酸不同的电化学性质,通过电化学方法采集反应的最终信号;数据处理时,根据标准曲线计算实际样本中待检霉菌毒素的含量。本发明对待检测物质的检测灵敏度可以达到皮克-纳克水平;本发明成本低,易获取,并可实现高通量检测。具有简单,经济,高灵敏度,易操作,痕量检测等优点。 | ||
搜索关键词: | 生物素 亲和 电化学 联用 检测 霉菌 毒素 方法 | ||
【主权项】:
生物素链霉亲和素与电化学联用检测霉菌毒素的方法,其特征在于,是在常规间接竞争ELISA反应的基础上,选用生物素标记的霉菌毒素单克隆抗体,并用碱性磷酸酶标记的链霉亲和素代替传统的酶标抗体,借助生物素链霉亲和素信号放大系统提高检测的灵敏度;并选用硝基苯磷酸作为碱性磷酸酶的催化底物,利用其产物硝基苯酚具有与硝基苯磷酸不同的电化学性质,通过电化学方法采集反应的最终信号;数据处理时,以梯度稀释的霉菌毒素标准品浓度对数为横坐标,以相应浓度的峰电流值与0标准品的阳性对照峰电流的比值为纵坐标,绘制标准抑制曲线后并根据标准曲线计算实际样本中待检霉菌毒素的含量。
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