[发明专利]一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法、降解其为异硫代氰酸盐的方法及功能性食品

摘要

本发明公开一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法、降解其为异硫代氰酸盐的方法及功能性食品，所述硫苷的提取方法中，用甲醇水溶液对脱脂后的茎瘤芥进行超声波萃取，分别采用乙酸乙酯、葡聚糖凝胶离子交换柱和HPLC进行纯化，对纯化后的硫苷冷冻干燥得到硫苷纯品；所述降解硫苷为异硫代氰酸盐的方法，用缓冲溶液将硫苷配成悬浊液，并添加抗坏血酸，用硫苷酶对茎瘤芥硫苷进行降解得到降解产物；所述功能性饮料包括如下成分红糖、荔枝汁、苹果酸、抗坏血酸、瓜尔豆胶、山梨酸钾、茎瘤芥硫代葡萄糖苷和水；所述功能性饼干中原料包括如下成分低筋面粉、黄油、白砂糖、全鸡蛋蛋液和硫苷降解后的产物。本发明具有工艺流程方法简单、易于操作的优点。

主权项

一种茎瘤芥硫代葡萄糖苷的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：1）预处理：对茎瘤芥叶子和种子进行预处理；将茎瘤芥叶子清洗干净，并自然风干至叶子表面枯干，将风干后的茎瘤芥叶子于烘箱中烘干18~32小时，干燥温度为90~100℃；将茎瘤芥种子于烘箱中烘干40~80分钟，干燥温度为95~105℃；2）研磨：将步骤1）烘干后的种子和叶子研磨成粉末，粉末用60目筛网过筛，取筛下物待用；3）脱脂：取步骤2）所述筛下物用无水乙醚于55~65℃水浴中使用索氏提取器脱脂2~5小时，脱脂结束后取出脱脂筛下物自然风干除去乙醚；4）粗硫苷的萃取：将步骤3）所述除去乙醚的脱脂筛下物在20~35℃下用甲醇水溶液进行超声波萃取，萃取后对萃取溶液进行过滤；其中，所述甲醇水溶液的体积浓度为65%~75%；所述脱脂筛下物与甲醇水溶液的质量体积比为1:5~20；所述超声波的功率为80 Hz；萃取时间为20~60分钟；5）粗硫苷的除杂：将步骤4）过滤后的滤液于2800~3200 r/min的离心条件下离心12~18分钟，离心后取上清液待用；向所述上清液中加入乙酸乙酯并转移入分液漏斗中，在室温下萃取5～15分钟除去脂溶性杂质后，弃去有机相层，保留上层清液，分离后的上层清液采用真空旋转蒸发仪蒸发出甲醇和乙酸乙酯，得粗提物；其中，乙酸乙酯与上清液体积比为1：1；蒸发仪的转速为95~105 r/min，温度为50~60℃，蒸发120～180 min；6）硫苷的纯化：将步骤5）得到的粗提物倒入DEAE Sephadex A‑25葡聚糖凝胶离子交换柱中，当粗提物全部倒入时，以40 mL 0.02 mol/L醋酸钠溶液进行洗涤，然后以40 mL水冲洗，最后以40 mL 0.5mol/L硫酸钾溶液洗脱，收集洗脱液；将所述洗脱液真空抽滤后，用高效液相色谱仪进行纯化；其中，液相色谱的流动相采用体积浓度为20%的乙腈水溶液，流动相的流速为3 mL/min；固定相采用反相C18柱，离子极性为负离子，柱温为25~30℃；清洗液采用甲醇；检测波长为229 nm，硫苷的收集时间为3.75~4.2分钟，收集得到纯化硫苷液体；7）冷冻干燥：将步骤6）得到的纯化硫苷液体进行冷冻干燥，于‑40~‑50℃下干燥3~5天，直至出现结晶时干燥结束，所述结晶物质即为硫苷纯品。