[发明专利]用于迟缓爱德华氏菌LAMP‑LFD检测的引物和探针序列及引物和探针的应用

摘要

本发明公开了用于迟缓爱德华氏菌LAMP‑LFD检测的引物和探针及引物和探针的应用，特点是包括三对LAMP的引物EtaompA‑F3、EtaompA‑B3；EtaompA‑FIP、EtaompA‑BIP；EtaompA‑LF、EtaompA‑LB；和一条探针EtaompA‑HP，核苷酸序列如SEQ NO1‑NO7所示，利用上述的引物和探针，通过LAMP反应体系扩增步骤，探针杂交LAMP反应产物步骤，使用LFD检测步骤实现迟缓爱德华氏菌的可视化检测，优点是具有更高的快捷性、特异性和灵敏度，仪器需求简单，有利于迟缓爱德华氏菌的早期诊断和检测，可满足基层检测机构和现场疫源地检测的需要。

主权项

一种用于迟缓爱德华氏菌的LAMP‑LFD检测的引物和探针序列，其特征在于根据迟缓爱德华氏菌外膜蛋白A的编码序列设计LAMP的三对引物序列和一条探针序列，引物序列具体如下：EtaompA‑F3：5’‑CATTAGCAGTGGCACTGG‑3’EtaompA‑B3：5’‑TGCCTTGAACTTACCGTTC‑3’，EtaompA‑FIP：5’‑TCGGATGAGACTTCGTGGAGTttttGTAGGTGGTAAACTGGGTTG‑3’，EtaompA‑BIP：5’‑CGGTGCTTTCTTCGGTTACCAttttCCAGTCGTAGCCCATTTC‑3’，EtaompA‑LF：5’‑AAGCTGTTACCGATGTAGTGG‑3’，EtaompA‑LB：5’‑CTAATCCGTACCTGGGCTTC‑3’，探针EtaompA‑HP：5’‑ATACGAATCAGCTGGGCGC‑3’，其中，EtaompA‑FIP的5’端为生物素标记；探针EtaompA‑HP的5’端为异硫氰酸荧光素标记。