[发明专利]用于河流弧菌LAMP-LFD检测的引物和探针序列及引物和探针的应用

摘要

本发明公开了用于河流弧菌LAMP-LFD检测的引物和探针及引物和探针的应用，特点是包括三对LAMP的引物VflompU-F3、VflompU-B3；VflompU-FIP、VflompU-BIP；VflompU-LF、VflompU-LB；和一条探针VflompU-HP，核苷酸序列如SEQ NO1-NO7所示，利用上述的引物和探针，通过LAMP反应体系扩增步骤，探针杂交LAMP反应产物步骤，使用LFD检测步骤实现河流弧菌的可视化检测，优点是具有更高的快捷性、特异性和灵敏度，仪器需求简单，有利于河流弧菌的早期诊断和检测，可满足基层检测机构和现场疫源地检测的需要。

主权项

一种用于河流弧菌的LAMP‑LFD检测的引物和探针序列，其特征在于根据河流弧菌的外膜蛋白ompU（GenBank登录号：KC182592）的编码序列设计LAMP的三对引物序列和一条探针序列，引物序列具体如下：VflompU‑F3：5’‑TCATGGCTTACCACGGTA‑3’VflompU‑B3：5’‑GGTGTAAGACGCTGCTAG‑3’，VflompU‑FIP：5’‑AGTTGAACCGTCATCGCTACGttttGGCCAGTTCTCTGACCTA‑3’，VflompU‑BIP：5’‑TCTACGCAATCGGCGACACttttCTTTGTCTTGGTCAGCGT‑3’，VflompU‑LF：5’‑ACGGTAAGTTGCACGTAGAG‑3’，VflompU‑LB：5’‑GTGAAACTAGGTGCTGGCT‑3’，VflompU‑FIP的5’端为生物素标记；探针序列如下：VflompU‑HP：5’‑CTCTGATAACAAACAAGATGG‑3’，5’端为异硫氰酸荧光素标记。