[发明专利]一种从狐狸粪中检测多房棘球绦虫的方法在审

专利信息
申请号: 201510422480.5 申请日: 2015-07-17
公开(公告)号: CN105018613A 公开(公告)日: 2015-11-04
发明(设计)人: 蒋韦斌;王正寰;王小明 申请(专利权)人: 上海师范大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 上海顺华专利代理有限责任公司 31203 代理人: 陆林辉
地址: 200234 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种从狐粪中检测多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis)病原的方法。本发明所提供的方法包括以下步骤:将收集的藏狐粪便样本置于70%乙醇中,-80℃冷冻保存3周以上。通过双层灭菌纱布富集粪样虫卵,利用组织破碎仪机械振荡破碎虫卵胚膜,使用粪便DNA提取试剂盒提取粪样中虫卵DNA,巢式PCR扩增鉴定虫卵。此方法操作简单,能快速检测狐粪中是否存在多房棘球绦虫的感染,敏感性高,特异性强。
搜索关键词: 一种 狐狸 检测 多房棘球 绦虫 方法
【主权项】:
一种从狐狸粪中检测多房棘球绦虫的方法,该方法包括以下步骤:A.藏狐粪便样本,保存在70%乙醇中,置于‑80℃冷冻3周以上;B.使用双层灭菌纱布进行粪样虫卵富集并利用组织破碎仪进行虫卵胚膜的破碎,通过粪便DNA提取试剂盒提取粪样中虫卵DNA;C.巢式PCR扩增步骤B得到的虫卵DNA并鉴定虫卵,巢式PCR扩增时四个特异引物分别是上游外部引物:F1如SEQ ID NO.1所示;下游外部引物:R1如SEQ ID NO.2所示;上游内部引物:F2如SEQ ID NO.3所示;下游内部引物:R2如SEQ ID NO.4所示。
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