[发明专利]一种基因突变提高抗氧化性的葡萄糖氧化酶及其方法有效
| 申请号： | 201510428825.8 | 申请日： | 2015-07-21 |
| 公开（公告）号： | CN105039362B | 公开（公告）日： | 2019-01-08 |
| 发明（设计）人： | 江正兵;宋慧婷;赵勇 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/81;C12N9/04 |
| 代理公司： | 武汉河山金堂专利事务所(普通合伙) 42212 | 代理人： | 丁齐旭 |
| 地址： | 430076 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种基因突变提高抗氧化性的葡萄糖氧化酶及其方法，该葡萄糖氧化酶由GOD‐M524L‐M528L突变基因构成。方法为：计算机模拟分析葡萄糖氧化酶序列，设计葡萄糖氧化酶编码基因突变体为GOD‐M524L‐M528L；全基因合成该基因序列，通过重叠延伸PCR扩增；克隆到pPIC9K载体上，线性化后电转入毕赤酵母GS115菌株中，再经培养表达、检测筛选，摇瓶发酵，收集发酵上清液，将发酵上清液透析去除盐离子，经层析纯化得到纯酶样品，经过氧化处理3.5h后检测，对照组GOD的残留酶活只有20％，而突变葡萄糖氧化酶GOD‐M524L‐M528L的残留酶活则达到30％，提高了其抗氧化性。 | ||
| 搜索关键词： | 葡萄糖氧化酶 抗氧化性 发酵上清液 基因突变 酶活 毕赤酵母GS115菌株 残留 重叠延伸PCR 计算机模拟 全基因合成 编码基因 层析纯化 基因序列 突变基因 氧化处理 摇瓶发酵 突变体 线性化 盐离子 检测 纯酶 扩增 去除 透析 突变 克隆 筛选 转入 分析 | ||
【主权项】：
1.一种基因突变提高抗氧化性的葡萄糖氧化酶，其特征在于该基因突变提高抗氧化性的葡萄糖氧化酶由GOD‑M524L‑M528L突变基因构成，即将其基因序列524位和528位的MET氨基酸突变为LEU，其具体序列为序列表NO3：葡萄糖氧化酶突变体GOD‑M524L‑M528L基因序列。
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