[发明专利]一种利用重组大肠杆菌高效生产转肽酶Sortase A的方法在审
| 申请号： | 201510430763.4 | 申请日： | 2015-07-21 |
| 公开（公告）号： | CN105695438A | 公开（公告）日： | 2016-06-22 |
| 发明（设计）人： | 吴志猛;赵鑫锐;洪皓飞;王珣 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用重组大肠杆菌高效生产转肽酶Sortase A的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了Sortase A在大肠杆菌中的高效生产，解决了目前已有报道中该酶表达水平较低的问题，在7L发酵罐中进行生产，所得Sortase A产量可达295.2mg/L，比优化前提高了58.5％；单位质量菌体酶活可达4845U/mg，比优化前提高了52.8％。本发明通过对重组菌株发酵生产条件的系统优化，为后续Sortase A的工业化生产奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 重组 大肠杆菌 高效 生产 肽酶 sortase 方法 | ||
【主权项】：
一种利用重组大肠杆菌高效生产转肽酶Sortase A的方法，其特征在于，重组大肠杆菌表达了来源于金黄色葡萄球菌的转肽酶基因srt；采用的发酵培养基组成为：蛋白胨5.1g/L、工业级酵母粉4g/L、甘油2.5g/L、KH2PO42.31g/L、K2HPO412.54g/L、3‑(N‑吗啉基)丙磺酸10g/L，pH 7.0；采用的发酵条件为：发酵温度30℃、诱导培养4h、诱导剂IPTG浓度100mM/L、诱导时机OD600＝0.6。
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