[发明专利]抗氧化沙棘HG型果胶膳食纤维及其分离纯化方法与应用

摘要

本发明涉及一种抗氧化沙棘HG型果胶膳食纤维，该果胶膳食纤维是指整体形态由长5~100μm、直径0.02~3.7μm的纤维丝交联而成的大小不同、表面平整光滑、分布均匀的片状结构，其糖链化学结构以α‑(1→4)‑D‑GalpA残基形成主链的HG型果胶；其分子量为4.4~180.7 kDa，半乳糖醛酸含量≥95%，葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖总含量＜5%，蛋白质含量＜1%，余量为人体必需金属元素。本发明从沙棘果实中分离纯化得到一种具有抗氧化活性的HG型果胶膳食纤维，其具有的膳食纤维功能性结构不仅能够有效阻止自由基的产生，而且能够显著清除已产生的自由基。此外，还含有少量的钠、镁、钾、铁、钙等人体必需金属元素。同时，本发明还公开了该果胶膳食纤维的纯化方法及应用。

主权项

抗氧化沙棘HG型果胶膳食纤维，其特征在于：该果胶膳食纤维是指整体形态由长5~100μm、直径0.02~3.7μm的纤维丝交联而成的大小不同、表面平整光滑、分布均匀的片状结构，其糖链化学结构以α‑(1→4)‑D‑GalpA残基形成主链的HG型果胶；其分子量为4.4~180.7 kDa，半乳糖醛酸含量≥95%，葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖总含量＜5%，蛋白质含量＜1%，余量为人体必需金属元素；其分离纯化方法，包括以下步骤：⑴将沙棘果加水经微波‑超声波协同提取，得到提取液，该提取液经离心去除沉淀，收集上清液A；所述上清液A在温度为60~80℃的条件下浓缩至原体积的20~40%后，得到浓缩液，该浓缩液用其质量3~4倍且体积浓度为95~100%的乙醇沉淀得到多糖沉淀；所述多糖沉淀经冷冻干燥得沙棘多糖；所述微波‑超声波协同提取条件是指料液质量比为1：15~25，微波功率为340~400W，超声波功率为800~860W，提取总时间为20~32min，温度为90~100℃；⑵将所述沙棘多糖按其质量的10~20倍加水复溶，经离心去除沉淀，得到上清液B，该上清液B经DEAE‑纤维素层析柱层析后，依次用2~3倍柱体积的蒸馏水和0.5 mol/L NaCl水溶液洗脱，并根据糖含量分布曲线收集0.5 mol/L NaCl水溶液的洗脱液A；所述洗脱液A依次经透析除盐、冷冻干燥，得到沙棘酸性多糖；所述透析除盐条件是指透析袋截留分子量500~3500Da，蒸馏水中透析24~48h；所述DEAE‑纤维素层析柱层析的条件是指色谱柱直径10~30cm、长度50~100cm，流动相依次为蒸馏水和0.5 mol/L NaCl，流速为20~40cm/h；⑶将所述沙棘酸性多糖按其质量的5~10倍加水溶解后，用Sepharose CL‑6B层析柱纯化，并根据糖含量分布曲线收集4.4~180.7 kDa分子量范围的洗脱液B；所述洗脱液B依次经透析除盐、冷冻干燥，即得沙棘HG果胶型膳食纤维；所述透析除盐条件均是指透析袋截留分子量500~3500Da，蒸馏水中透析24~48h；所述Sepharose CL‑6B层析柱纯化条件是指色谱柱直径1~5cm、长度80~120cm，流动相为0.05~0.5mol/L NaCl水溶液，流速为10~20cm/h。