[发明专利]一种水浴振荡辅助酶法提取双孢蘑菇多糖的工艺

摘要

本发明公开了一种水浴振荡辅助酶法提取双孢蘑菇多糖的工艺，所述工艺包括：原料预处理→冷冻干燥→乙醇回流→水浴振荡酶解→灭酶离心→上清液测多糖含量；本发明工艺操作简单，制作方便，并且以双孢蘑菇粗多糖提取率为指标，对影响水浴振荡辅助酶法提取双孢蘑菇多糖的一些重要因素包括震荡频率、PH值、酶解时间、酶解温度进行研究。本发明增加了双孢蘑菇粗多糖的提取效率和提取纯度，方便了科学实验研究数据。本发明中的工具操作简单，原材料易获得，提取环境简单，提取效率高。

主权项

一种水浴振荡辅助酶法提取双孢蘑菇多糖的工艺，所述工艺包括：原料预处理→冷冻干燥→乙醇回流→水浴振荡酶解→灭酶离心→上清液测多糖含量，其特征在于：所述具体步骤为：1）原料预处理：选取新鲜,呈乳白色,无异味,无虫斑,无病害和机械损伤的双孢蘑菇；将双孢蘑菇用清水清洗,洗净泥土、杂质及碎屑；将洗净后的双孢蘑菇切片，放入100℃的热水中烫漂4min，双孢蘑菇和水的比例为1：10；烫漂后,捞入清水中急速冷透后备用；将双孢菇与护色液一同倒入打浆机,进行打浆处理,得到双抱菇原浆；将双抱菇原浆粉碎后倒入平板中；2）冷冻干燥：将平板中的双孢蘑菇原浆经冷冻干燥后得双孢蘑菇粗粉；3）乙醇回流：称取一定量的双孢蘑菇粗粉，用80%的乙醇回流2h除去其中低聚糖、单糖物质后得初干粉，干燥备用；4）水浴振荡酶解：将初干粉中加入料液比1:20‑1:60的蒸馏水，并加入0.5%‑2.5%的木瓜蛋白酶，调节PH值为5.5‑7，振荡频率20‑60r/min、酶解温度55‑75℃、酶解时间30‑150min，进行酶解反应；5）灭酶离心：酶解反应完毕后放入沸水浴中5min使木瓜蛋白酶失活，离心取得上清液；6）测多糖含量：取一定量上清液将其定容，采用硫酸‑苯酚法测定多糖含量，不同PH的缓冲液用磷酸二氢钾和磷酸二氢钠配制得浸提液。