[发明专利]一种提取真菌基因组DNA的试剂盒

摘要

本发明涉及一种提取真菌基因组DNA的试剂盒，属于生物技术领域。本发明所述的提取真菌基因组DNA的试剂盒，包括真菌细胞的破碎，DNA的游离与杂蛋白的抽除，DNA吸附柱吸附DNA以及杂质的去除，DNA洗脱的具体步骤，最后所得液体为真菌基因组DNA,于1%琼脂糖凝胶中电泳检测。常规的真菌基因组DNA的提取步骤繁琐，耗时较长，一般需要18h左右才能提取到真菌基因组DNA。利用本发明所述的方法，与常规的真菌基因组提取方法相比仅需要7h左右即可提取到真菌基因组DNA，不仅节省了大量提取时间，还能够更有效、快速、经济地提取到真菌基因组DNA。同时适用于商业化生产，具有一定的经济价值。

主权项

一种提取真菌基因组DNA的试剂盒，包括真菌细胞的破碎，DNA的游离与杂蛋白的抽除，DNA吸附柱吸附DNA以及杂质的去除，DNA洗脱，其特征是：真菌细胞的破碎：挑取真菌样本于研钵中，加入液氮研磨成粉状，将粉末加入1.5ml离心管中，加入200‑700ml Buffer A,20‑50μl Buffer B,10‑50μl Buffer C,于50‑60℃温浴5‑10h；DNA的游离与杂蛋白的抽除：加入200‑700μl Buffer D抽提，10000‑15000rpm/min 离心5‑15min，将上清转移至干净的1.5ml离心管中；加入500μl Buffer E抽提，10000‑15000rpm/min 离心5‑15min，将上清转移至干净的1.5ml离心管中；DNA吸附柱吸附DNA以及杂质的去除：往离心管中加入两倍体积的沉淀剂，混匀后加入DNA吸附柱，10000‑15000rpm/min 离心1‑2min，弃废液，加入200‑700μl去蛋白液，10000‑15000rpm/min 离心1‑2min，弃废液，加入200‑700μl漂洗液，10000‑15000rpm/min 离心1‑2min，弃废液，加入200‑700μl漂洗液，10000‑15000rpm/min 离心1‑2min，弃废液，10000‑15000rpm/min 离心1‑2min，静置吹干；DNA洗脱：往吸附柱中加入30μl洗脱液，10000‑15000rpm/min 离心1‑2min，所得液体为真菌基因组DNA,于1%琼脂糖凝胶中电泳检测。