[发明专利]转基因大豆的检测试剂盒和检测方法有效
申请号: | 201510451305.9 | 申请日: | 2015-07-29 |
公开(公告)号: | CN105087558B | 公开(公告)日: | 2017-08-25 |
发明(设计)人: | 温洪涛;关海涛;张瑞英 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙)11447 | 代理人: | 王浩然,周建秋 |
地址: | 150086 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明提供了一种引物组,该引物组包括外引物对、内引物对和环引物对;其中,所述外引物对包括SEQ ID NO1和SEQ ID NO2所示的引物;所述外引物对包括SEQ ID NO1和SEQ ID NO2所示的引物;所述外引物对包括SEQ ID NO3和SEQ ID NO4所示的引物;所述外引物对包括SEQ ID NO5和SEQ ID NO6所示的引物。本发明还提供了一种试剂盒,该试剂盒至少包括如上所示的引物组和环介导等温核酸扩增试剂。本发明还提供了一种检测转基因大豆MON87701的方法。通过上述技术方案,本发明能够通过环介导等温核酸扩增方法对转基因大豆MON87701实现快速、简便、灵敏且准确地检测。 | ||
搜索关键词: | 转基因 大豆 检测 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
一种试剂盒,其特征在于,该试剂盒至少包括引物组和环介导等温核酸扩增试剂;其中,所述引物组包括外引物对、内引物对和环引物对;所述外引物对包括SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物;所述内引物对包括SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的引物;所述环引物对包括SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的引物;其中,所述环介导等温核酸扩增试剂包括扩增缓冲液、dNTP和DNA聚合酶;其中,所述扩增缓冲液含有8‑12mM的KCl、8‑12mM的(NH4)2SO4、1‑3mM的MgSO4和0.05‑0.2体积%的TritonX‑100且pH值为8.6‑9.0;其中,所述环介导等温核酸扩增试剂还包括6‑10mM的MgSO4和4‑8mM的甜菜碱;其中,该试剂盒还含有显色试剂,所述显色试剂为荧光染料SYBR Green I;其中,所述外引物对以8‑12μmol/L的溶液的形式存在,所述内引物对以35‑45μmol/L的溶液的形式存在,所述环引物对以18‑22μmol/L的溶液形式存在。
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