[发明专利]转基因小鼠骨骼肌营养不良模型的构建方法有效
| 申请号： | 201510459821.6 | 申请日： | 2015-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN106399362B | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 孟庆勇;刘春城;王萌;张阔;李宁 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A01K67/027 |
| 代理公司： | 11002 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王文君;黄爽<国际申请>=<国际公布>= |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种转基因小鼠骨骼肌营养不良模型的构建方法，其是利用Tet‑on系统与转基因技术构建可以在肌肉内特异性诱导表达microRNA29a和microRNA29b1的转基因小鼠，可作为人Ullrich型先天性肌营养不良的实验动物模型，与Ullrich型先天性肌营养不良的表现相同，本发明构建的实验动物模型在生长过程中也存在严重的呼吸问题，约17％的小鼠会在断乳前由于呼吸障碍而死亡，全部转基因鼠会出现骨骼肌发育不良，为人Ullrich型先天性肌营养不良的治疗与研究提供了有力的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 肌营养不良 构建 骨骼肌 实验动物模型 转基因小鼠 特异性诱导表达 转基因技术 发育不良 呼吸障碍 生长过程 转基因鼠 营养不良 断乳 小鼠 肌肉 呼吸 治疗 死亡 表现 研究 | ||
【主权项】：
1.一种转基因小鼠骨骼肌营养不良模型的构建方法，其特征在于，将表达载体pTet-On-α-actin和pTRE2-29分别通过受精卵原核显微注射的方式制备转基因小鼠，然后通过pTet-On转基因小鼠与pTRE2转基因小鼠杂交，即得到在子代中特异性表达rtTA基因，并且在强力霉素存在时表达microRNA29a和microRNA29b1的小鼠；/n其中，表达载体pTet-On-α-actin是以pTet-On为骨架载体，将pTet-On中的Pcmv启动子替换成α-actin启动子；表达载体pTRE2-29是以pTRE2为骨架载体，将microRNA29a和microRNA29b1的编码序列串联到Pminicmv下游；/n所述表达载体pTet-On-α-actin和pTRE2-29的核苷酸序列分别如Seq ID No.1和2所示。/n
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