[发明专利]一种水氮耦合下根系分泌物的收集方法

摘要

本发明公开一种水氮耦合下根系分泌物的收集方法，包括以下步骤步骤一、先在田地以S形状填埋黑色营养袋，移栽秧苗时，每个营养袋中栽插植株1穴；步骤二、取出营养袋和秧苗，将秧苗先用流水冲洗，然后用压缩喷雾器冲洗，再依次置于CaCl2和氯霉素溶液中浸泡，浸泡完成后用去离子水冲洗干净，得到植株完整根系；步骤三、将植株完整根系置于装有去离子水的三角瓶中，每个三角瓶中放入植株1穴，然后向三角瓶中加入PEG，在光照条件下培养，培养结束后，收集三角瓶中的溶液，保存；步骤四、浓缩，并置于‑20℃条件下保存。本发明能够准确的收集根系分泌的物质，抑制土壤中微生物对根系分泌物的分解，减少收集的溶液中包含较多的应急物质。

主权项

一种水氮耦合下根系分泌物的收集方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、移栽先对田地进行氮肥处理，然后在每个氮肥处理区以S形状填埋黑色营养袋，营养袋的袋底和侧面设有多个滤水透气孔，移栽水稻秧苗时，每个营养袋中栽插水稻1穴，活颗后进行水分胁迫处理，其中，氮肥处理的处理总量为0‑360kg hm‑2，水分胁迫处理为土壤水势为‑20‑0 kPa；步骤二、取根取出埋入土中的营养袋和水稻，剥去营养袋，将水稻秧苗置于尼龙网袋中，先用流水冲洗，然后用压缩喷雾器冲洗，得到干净根系，备用；将干净根系依次置于CaCl2和氯霉素溶液中，分别浸泡0.5‑1 h，浸泡完成后用去离子水冲洗干净，得到水稻完整根系，备用；步骤三、收集将步骤二得到的水稻完整根系置于装有去离子水的三角瓶中，每个三角瓶中放入水稻1穴，三角瓶的外部通过黑色塑料袋包裹，并在三角瓶的瓶口处将植物完整根系固定，然后向每个三角瓶中加入聚乙二醇6000，体积百分比为10%，在光照条件为光强600‑800 µmol m‑2 s‑1，冠层温度25‑30℃条件下培养4h，培养结束后，收集三角瓶中的溶液，并储存于棕色瓶中，在4℃条件下保存，备用；步骤四、浓缩将步骤三收集的溶液置于真空旋转蒸发器内，浓缩，并将得到的浓缩液置于‑20℃条件下保存，即完成水稻根系分泌物的收集。