[发明专利]一种快速评价化合物对斑马鱼肝脏功能损伤作用的方法

摘要

本发明涉及一种快速评价化合物对斑马鱼肝脏功能损伤作用的方法，包括如下步骤(1)将受精后正常斑马鱼胚胎移入培养孔中；(2)对培养孔中的斑马鱼胚胎连续给药孵育，记为待测化合物组；(3)观察斑马鱼胚胎肝脏，记录并计算斑马鱼胚胎肝脏面积和斑马鱼胚胎体面积；(4)根据待测化合物组的斑马鱼胚胎的肝脏面积指数与正常斑马鱼胚胎的肝脏面积指数的范围的关系，判断待测化合物是否具有肝脏毒性；本发明首次将肝脏面积指数作为斑马鱼肝功能评价的检测指标，更加科学、客观，提高了结果的准确性。建立的化合物对斑马鱼肝功能损伤作用的评价模型具有制作简单、快速、稳定可靠和重复性好的优点。

主权项

一种快速评价化合物对斑马鱼肝脏功能损伤作用的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将受精后2～4天的发育正常斑马鱼胚胎移入培养孔中；(2)对培养孔中的斑马鱼胚胎连续给药孵育1～3天，记为待测化合物组；(3)观察斑马鱼胚胎肝脏，记录并计算斑马鱼胚胎肝脏面积和斑马鱼胚胎体面积，按照如下公式计算肝脏面积指数：肝脏面积指数＝肝脏面积/体面积×100％；(4)当步骤(3)计算的待测化合物组的斑马鱼胚胎的肝脏面积指数不在正常斑马鱼胚胎的肝脏面积指数的范围内，且达到统计学上的显著性水平(P<0.05)，则待测化合物具有肝脏毒性；当步骤(3)计算的待测化合物组的斑马鱼胚胎的肝脏面积指数在正常斑马鱼胚胎的肝脏面积指数范围内，则待测化合物不具有肝脏毒性；所述的正常斑马鱼胚胎的肝脏面积指数为：受精后3d的斑马鱼肝脏面积指数为0.40～0.68％，受精后4d的斑马鱼肝脏面积指数为1.99～2.66％，受精后5d的斑马鱼肝脏面积指数为3.07～3.82％，受精后6d的斑马鱼肝脏面积指数为3.93～4.84％，受精后的7d斑马鱼肝脏面积指数为3.25～4.39％。