[发明专利]一种GII.4型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法

摘要

本发明公开了一种GII.4型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法。本发明分别以六对引物作为扩增引物的上下游引物，以GII.4型诺如病毒的RNA为模板进行RT‑PCR扩增，分别得到扩增产物，然后对扩增产物进行核酸序列测序，然后再拼接比对，得到GII.4型诺如病毒基因组全长序列。本发明针对GII.4型诺如病毒主要流行基因型，根据基因组所包含的三个开放阅读框设计了“4+1+1”的分段扩增策略，并根据保守区域设计相应的扩增引物；其能有效的扩增出GII.4型诺如病毒的全基因组序列。本发明可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。

主权项

一种GII.4型诺如病毒基因组扩增引物，其特征在于，包括六对扩增引物：引物对1：P1F：5'‑GTGAATGAAGATGGCGTCTAAC‑3'；P1596R：5'‑TCGACGCCATTGCGTGGGA‑3'；引物对2：P1258F：5'‑CAACCATATGACCACCTTGCT‑3'；P2805R：5'‑ATGGCCACCTCCTCATAGTA‑3'；引物对3：P2689F：5'‑AGGTCTCAGTGATGAAGAG‑3'；P4248R：5'‑GGGCCATCCTCATTCATATTCA‑3'；引物对4：P4099F：5'‑TGGTAAGATCAAGAAGAGGCT‑3'；G2SKR：5'‑CCRCCNGCATRHCCRTTRTACAT‑3'；引物对5：NV2of2：5'‑GGAGGGCGATCGCAATC‑3'；GV132：5'‑CCRGCRAAGAAAGCTCCAGCCAT‑3'；引物对6：P6484F：5'‑CAGCACAATCTGATGTGGC‑3'；P7513R：5'‑TTACACCCGTGACTCCCCT‑3'。