[发明专利]分离测定阿维A及其基因毒性杂质的方法

摘要

本发明属于分析化学领域，涉及一种分离测定阿维A及其基因毒性杂质的方法。用于固液分离测定阿维A及其基因毒性杂质的试剂组合物为酸性水溶液体系和有机溶剂；采用上述试剂组合物阿维A及其基因毒性杂质的方法为取供试样品溶于四氢呋喃，用稀释剂稀释得样品溶液；配制流动相；将所述样品溶液注入分离检测系统中，用所述流动相对所述样品溶液进行洗脱分离得洗脱液；所述洗脱液进入检测器测定。本发明能同时将阿维A及其基因毒性杂质完全分离，检测中溶剂峰不干扰阿维A及其基因毒性杂质的测定，分离度大于1.5；且本方法简单，灵敏度高，分析时间短，专属性强，重现性好，可以同时有效分离及高灵敏(达ppm级)测定阿维A原料药及制剂中基因毒性杂质含量。

主权项

高效液相色谱法分离测定阿维A及其基因毒性杂质的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1)配制空白溶液：取四氢呋喃用有机溶剂稀释，得空白溶液；2)配制供试样品溶液：取供试样品溶于四氢呋喃，再用有机溶剂稀释，得供试样品溶液；3)配制基因毒性杂质对照溶液：取阿维A基因毒性杂质对照品溶于四氢呋喃，再用有机溶剂稀释溶解制成各个阿维A基因毒性杂质溶液，得对照溶液；4)分别取步骤1)所述空白溶液、步骤2)所述供试样品和步骤3)所述对照溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，确定阿维A及其基因毒性杂质的保留时间，计算供试样品中阿维A及其基因毒性杂质的含量；步骤2)中所述供试样品与四氢呋喃的质量体积比为40:10mg/ml；所述高效液相色谱分析中所用的流动相由酸性水溶液体系和有机溶剂组成，配置冰乙酸的体积百分比为0.5‑1.0％的酸性水溶液体系，所述酸性水溶液体系与有机溶剂的体积比为5:95；所述有机溶剂为甲醇；高效液相色谱分析中采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；所述基因毒性杂质包括阿维A甲酯和/或阿维A丁酯，具体名称及结构为：阿维A甲酯结构式：阿维A丁酯结构式：步骤1)所述样品溶液中阿维A的浓度为0.3mg/ml‑0.5mg/ml。