[发明专利]用于创伤弧菌临床检测的前增菌液体培养基及应用

摘要

本发明涉及到一种用于创伤弧菌检测的前增菌液。根据创伤弧菌的生化特性和培养特点，该增菌液添加了氮源、碳源、无机盐、维生素和其他一些生长因子，而且该增菌液具有适宜创伤弧菌生长的氧化还原电位、pH值和渗透压。相比于目前临床和食品检测使用最广泛的碱性蛋白胨水，该增菌液更利于待检样本内微量创伤弧菌的生长和复苏，缩短了培养时间，提高了阳性检出率，且能有效抑制其他非目标菌(如大肠埃希菌、假单胞菌属及其他革兰阳性菌)的生长繁殖。本发明制备方便，成本低廉，增菌的能力强，适用于各级医院及检验机构的创伤弧菌检测应用。

主权项

一种用于创伤弧菌检测的前增菌液，其特征在于，1L所述的前增菌液由下列的物质组成：蛋白胨10g、氯化钠30g、氯化镁2.0～3.0g、氯化钾0.5～1.0g、硫代硫酸钠6～10g、增殖因子0.1～0.3g、多粘菌素B 400000IU、多粘菌素E 100000IU，余量为水；所述的增殖因子为酪酸梭菌破壁产物，其制法和特征如下：(1)丁酸梭菌发酵：将丁酸梭菌的种子液按1％重量比的接种量接入已灭菌后的含有以重量百分比计的蛋白胨1％、酵母提取物2％、葡萄糖2.5％、硫酸铵0.1％、碳酸氢钠0.1％、硫酸锰0.02％、硫酸镁0.02％和氯化钙0.002％的液体培养基中，经36℃～38℃厌氧发酵后，3000rpm 15～20min离心2～3次和洗脱，得丁酸梭菌菌泥；(2)细胞破壁：将步骤(1)培养得到的丁酸梭菌菌泥按1∶5～1∶10加蒸馏水或生理盐水，使用高压细胞破碎机，在150MPa压力下破碎，得到细胞破壁产物；(3)干燥：将步骤(2)高压后获得的细胞破壁产物于真空负压状态下冷冻干燥即得干燥的活性产物，并经过粉碎得到灰白色粉末；所述的丁酸梭菌为丁酸梭菌(Clostridium butyricum)WZMC1016菌株，保藏编号为CGMCC No.9831。