[发明专利]一种人血白蛋白的制备方法

摘要

本发明涉及生物制品和血液制品生产的技术领域，主要涉及血液制品生产中人血白蛋白的分离纯化方法，具体为一种人血白蛋白的制备方法。以健康人血浆上清为原料，采用Kistler‑Nitchmann低温乙醇法沉淀、分离组分FI+II+III和组分FIV，对组分FIV分离后上清液进行脱醇处理后，再配合一步离子交换层析，超滤，加入适量的辛酸钠作为稳定剂，经巴氏病毒灭活处理后得到人血白蛋白成品。经高效液相色谱法检测该工艺制备的人血白蛋白的纯度≥99％，多聚体含量≤1％，收率达到28~30g/L血浆。制品的纯度更高，杂蛋白含量更低，使得临床用药更加安全。

主权项

一种人血白蛋白的制备方法，步骤如下：(1)组分FI+II+III分离；(2)组分FIV分离；(3)组分FIV分离后上清液处理；(4)离子交换层析；(5)超滤和巴氏病毒灭活处理；其中，(3)组分FIV分离后上清液处理用10KDa的超滤膜包对组分FIV分离后的上清液进行脱醇处理，超滤稀释液为注射用水，超滤至上清液乙醇浓度≤10％，电导率≤5mS/cm，蛋白质含量5～50mg/ml，用0.1～0.3mol/L氢氧化钠或盐酸溶液调节pH4.0～6.9；得到精制的FIV分离后上清液；(4)离子交换层析将适量凝胶装填在层析柱内，柱床体积与上样体积的比例为1:5～1:50，装填好的层析柱使用含有枸橼酸钠≤10mmol/L、pH4.0～6.9的缓冲液平衡2～5个柱体积；精制的FIV分离后上清液经过0.2μm的在线膜过滤后泵入层析柱；再使用含有枸橼酸钠≤10mmol/L、氯化钠≤1.5mol/L、pH4.0～6.9的缓冲液洗涤层析柱，收集层析过程中的流穿液和洗涤液，得到层析混合液；最后用含有枸橼酸钠≤10mmol/L、2mol/L氯化钠、pH4.0～6.9的缓冲液与0.3～0.5mol/L的氢氧化钠溶液交替处理层析柱；20％乙醇保存，层析过程中控制流速60～240cm/h；步骤(4)中，采用的凝胶为阴离子交换凝胶Fractogel TMAE或者Capto DEAE。