[发明专利]一种双重载药的荧光磁性微球复合体系及其制备方法

摘要

本发明公开了一种双重载药荧光磁性微球体系的制备，包括①超声化学法合成磁性山奈酚微球；②水热法合成氨基化石墨烯量子点并实现对紫杉醇的负载；③通过氨羧反应将负载紫杉醇的石墨烯量子点连接到磁性微球上，得到负载山奈酚和紫杉醇药物的荧光磁性微球复合体系。所制备的荧光磁性微球体系中，石墨烯量子点通过π–π物理作用实现对紫杉醇的负载，以及磁性微球通过物理包埋实现对山奈酚的负载，从而实现双重载药。所制备的双重载药荧光磁性微球体系装载紫杉醇和山奈酚两种抗癌药，山奈酚能显著增强人宫颈癌Hela细胞对化疗药物紫杉醇的敏感性，该双重载药荧光磁性微球体系能提高疗效并延缓耐药性产生、大大降低抗癌药毒副作用。

主权项

一种双重载药的荧光磁性微球复合体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：超声化学法合成磁性山奈酚微球，具体过程：将疏水性药物山奈酚溶于油基改性Fe3O4磁流体，混合均匀后，用注射器滴入牛血清蛋白溶液中，超声、搅拌形成均匀乳液；将该乳液在250～400W超声功率下超声破碎，超声破碎时间10～20min，反应后将产物磁吸洗涤、真空干燥，得到负载山奈酚药物的磁性微球；所述油基改性Fe3O4磁流体，磁流体介质为环己烷，Fe3O4磁流体的质量分数为20％；所述牛血清蛋白溶液的质量分数为2％；所述的疏水性药物山奈酚与油基改性Fe3O4磁流体的质量比为1：400；步骤2：水热法合成氨基化石墨烯量子点并通过π–π作用实现对紫杉醇的负载，具体过程如下：水热法合成绿色的石墨烯量子点GQDs，粒径大小5～10nm；将紫杉醇PTX和石墨烯量子点添加到pH＝7.4的PBS磷酸缓冲溶液中，将混合液超声分散，混合均匀，在黑暗中不断搅拌，振荡12～24h，获得载有紫杉醇的石墨烯量子点溶液PTX/GQDs‑NH2；将此溶液离心，取沉淀物进行真空干燥，干燥后得到石墨烯量子点载药体系，备用；紫杉醇在PBS磷酸缓冲溶液中的质量体积比为1mg：30ml；石墨烯量子点在PBS磷酸缓冲溶液中的质量体积比为15mg：30ml；所得到的石墨烯量子点载药体系中，紫杉醇：石墨烯量子点质量比1:15；步骤3：通过氨羧反应将负载紫杉醇的石墨烯量子点连接到磁性微球上，得到了同时负载山奈酚和紫杉醇药物的荧光磁性微球复合体系，具体过程如下：将磁性山奈酚微球、羟基琥珀酰亚胺NHS加入H2O中，磁性山奈酚微球的质量浓度为0.4～0.6mg/mL、羟基琥珀酰亚胺NHS与磁性山奈酚微球的质量比为86：75，在20～30℃的温度下反应0.5～1h；加入1‑乙基‑3‑二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸盐EDC，于20～30℃下振荡反应1～3h，EDC与磁性山奈酚微球的质量比为4：3；在上述反应后的溶液中加入浓度为0.2～0.4mg/mL载有紫杉醇的石墨烯量子点PTX/GQDs‑NH2水溶液，载紫杉醇的石墨烯量子点与磁性山奈酚微球的质量比为2：5；于20～30℃的反应温度下振荡反应6～18h；反应后将产物磁吸分离、去离子水洗涤、在30～50℃下干燥，得到同时负载山奈酚和紫杉醇药物的荧光磁性微球复合体系；步骤4：将荧光磁性双重载药微球进行药物缓释实验步骤5：将荧光磁性双重载药微球与与宫颈癌Hela细胞共培育，用MTT法检测细胞毒性。