[发明专利]植物种子特异表达启动子OsSee1有效

专利信息
申请号: 201510493787.4 申请日: 2015-08-12
公开(公告)号: CN105063047B 公开(公告)日: 2018-08-28
发明(设计)人: 魏鹏程;杨剑波;李莉;李浩;许蓉芳;马卉;杨亚春;秦瑞英 申请(专利权)人: 安徽省农业科学院水稻研究所
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/11;C12N15/84;C12N1/21;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 北京律谱知识产权代理事务所(普通合伙) 11457 代理人: 黄云铎
地址: 230031 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明公开一种植物种子特异表达启动子OsSee1的克隆及应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体并将其应用于植物基因工程中。本申请的发明人通过对水稻品种日本晴的特定基因组进行扩增、分离、分析、利用以及实验验证,从而获得并验证了具有特殊功能的一段DNA序列——水稻种子特异性表达启动子OsSee1。本发明提供的启动子能够特异地驱动外源基因在水稻种子中表达,因此在基因工程中用该启动子替代组成型启动子驱动目标基因,既可以特异性的表达目的基因,又将避免其它基因的无效表达,从而达到改良水稻品质的作用。
搜索关键词: 植物种子 特异 表达 启动子 ossee1
【主权项】:
1.一种培育高产水稻中的方法,其特征在于,所述方法包括序列表中SEQ ID No:1所示的DNA序列与目标基因相连,并构建于载体中获得重组表达载体,然后,将成熟种子去掉颖壳后,用70%酒精浸泡种子1min,倒掉酒精; 用含有1滴Tween20的50%次氯酸钠溶液浸泡种子40min;倒掉次氯酸钠,无菌水洗5遍至溶液澄清,无次氯酸钠味道;无菌水浸泡种子过夜;用解剖刀沿种子的糊粉层将胚剥下,将胚接种于愈伤诱导培养基上;30℃下暗培养11天后将愈伤与胚乳及胚芽分离,将去芽的状态良好、分裂旺盛的初级愈伤组织进行预培养3~5天后用于农杆菌的转化;将所述重组表达载体转化到根癌农杆菌,采用上述转入了重组表达载体的根癌农杆菌进行农杆菌介导的遗传转化,将所述重组表达载体转入水稻细胞、组织或器官中进行培育,所述目标基因为促进种子发育速度的基因。
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