[发明专利]利用兔抗鸡IgY-纳米金免疫散射探针作检测鸡IgY-标准曲线方法及检测方法

摘要

本发明公开了一种利用兔抗鸡IgY-纳米金免疫散射探针作检测鸡IgY-标准曲线方法及检测方法。该方法包括：制备水溶性、分散性良好的纳米金，将其与兔抗鸡IgY抗体偶联成特异性免疫探针，直接用于检测IgY，建立了快速、灵敏的定量检测IgY的新方法。该技术提供了一种检测IgY的新方法，具有灵敏度高、准确度高、检出限低、抗干扰能力强等优点，且操作简便、仪器设备要求低，有利于推广和应用。该方法可应用于禽蛋制品、保健食品等相关产品中IgY的快速、定量测定，具有广阔的应用前景。

主权项

一种利用兔抗鸡IgY‑纳米金免疫散射探针制作检测鸡卵黄免疫球蛋白标准曲线的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将兔抗鸡IgY抗体加入到纳米金溶液中，搅拌均匀，再加入聚乙二醇20000，继续搅拌得到兔抗鸡IgY‑纳米金免疫散射探针溶液，并置于4℃条件下保存备用；2)将兔抗鸡IgY‑纳米金免疫散射探针溶液、IgY和PBS缓冲液进行混合，然后用双蒸水定容至5mL；即得到含有不同浓度的IgY的混合溶液，其中，混合溶液中IgY的浓度为0～200ng/mL；3)将上述得到含有不同浓度的IgY的混合溶液分别置于荧光分光光度计中进行同步扫描测定其散射光谱，含有IgY的混合溶液的散射强度I₁，不含IgY的混合溶液原始散射强度为I₀；观察散射光谱图的变化；其中，同步扫描设定为Δλ＝0，即λ_em＝λ_ex；4)通过对照原始散射强度I₀与加入IgY反应后溶液散射强度I₁之间的散射强度变化量ΔI＝I₁‑I₀，得到IgY浓度与ΔI之间的线性关系，建立IgY定量检测方程。