[发明专利]核酸萃取方法

摘要

本案提供一种核酸萃取方法，包含下列步骤：(a)将一样本与一裂解缓冲液混合，其中该裂解缓冲液的pH值小于7；(b)将该样本与该裂解缓冲液的混合液移至包含壳聚糖涂布材料的一核酸抓取槽体，以使该样本中的核酸与该壳聚糖涂布材料结合；(c)以一清洗缓冲液清洗该壳聚糖涂布材料，以移除残留的蛋白质及细胞残渣；以及(d)以一冲提缓冲液冲提该壳聚糖涂布材料并同时对该壳聚糖涂布材料进行加热，使得该核酸与该壳聚糖涂布材料分离，其中该冲提缓冲液的pH值大于7。本案的核酸萃取方法，可避免公知技术因采用离液盐及乙醇或异丙醇等抑制剂而影响后续DNA分析应用的缺点，且可提升冲提效率，可萃取出更高产量及纯度的核酸。

主权项

1.一种核酸萃取方法，其整合至一生物晶片卡夹，该生物晶片卡夹包含一样本存放槽体、一第一清洗缓冲液存放槽体、一第二清洗缓冲液存放槽体、一冲提缓冲液存放槽体、一核酸抓取槽体及一废液槽体，该核酸抓取槽体与其他所有该槽体连接，且气体压力会输入各该槽体，以驱动流体在该生物晶片卡夹的各该槽体间的流动，该核酸萃取方法包含下列步骤：(a)将一样本与一裂解缓冲液于该样本存放槽体中混合，其中该裂解缓冲液的pH值小于7；(b)施加正压于该样本存放槽体，以将该样本与该裂解缓冲液的混合液移至包含壳聚糖涂布材料的该核酸抓取槽体，以使该样本中的核酸与该壳聚糖涂布材料结合；(c)施加正压于该第一清洗缓冲液存放槽体一段时间，以将pH值小于7的一第一清洗缓冲液自该第一清洗缓冲液存放槽体推进至该核酸抓取槽体，接着施加正压于该第一清洗缓冲液存放槽体及施加负压于该废液槽体，使得该第一清洗缓冲液自该第一清洗缓冲液存放槽体经该核酸抓取槽体连续流动至该废液槽体，以使该第一清洗缓冲液清洗该壳聚糖涂布材料，藉此移除残留的蛋白质及细胞残渣；(d)施加正压于该第二清洗缓冲液存放槽体及施加负压于该废液槽体，使得pH值介于9‑11之间的一第二清洗缓冲液自该第二清洗缓冲液存放槽体经该核酸抓取槽体连续流动至该废液槽体，以使该第二清洗缓冲液清洗该壳聚糖涂布材料，藉此中和该核酸抓取槽体的pH值，以使该核酸抓取槽体的pH值提升至接近7；以及(e)施加正压于该冲提缓冲液存放槽体，使来自该冲提缓冲液存放槽体的一冲提缓冲液冲提该壳聚糖涂布材料并同时对该壳聚糖涂布材料进行加热，使得该核酸与该壳聚糖涂布材料分离，其中该冲提缓冲液的pH值介于9‑11之间；其中该步骤(c)重复一次以提升清洗效率。