[发明专利]一种提高大肠杆菌中可溶性重组原动蛋白2β表达水平的方法有效
| 申请号： | 201510516845.0 | 申请日： | 2015-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN105087725B | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 闻崇炜;赵烨清;周慧莲;欧阳臻;王晓燕 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种有效提高大肠杆菌中可溶性重组蛋白质表达水平的工艺方法，其步骤如下：将表达重组蛋白质的工程菌冻存液按0.1%比例接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃振荡培养过夜获得种子液，随后将种子液按照1%比例接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃继续振荡培养至培养液OD600达到预设诱导起点的75%～90%，然后将培养温度升高至40℃继续培养0.5～1.5hr，待培养液OD600达预设诱导起点后，向培养液中添加诱导物，继续以37℃或者40℃振荡培养6hr，菌体内可以产生显著的可溶性重组蛋白质。本发明简便有效，成本低廉，易于放大，适用于生物工程及基因工程中用大肠杆菌表达各种可溶性异源重组蛋白质。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 大肠杆菌 可溶性 重组 蛋白质 表达 水平 方法 | ||
【主权项】：
1.一种提高大肠杆菌中可溶性重组原动蛋白2β表达水平的方法，其特征在于，按照下述步骤进行：（1）将表达重组原动蛋白2β的工程菌E.coliBL21（DE3）pET‑PK2β冻存液接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃振荡培养过夜获得种子液；（2）随后将种子液按接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃继续振荡培养至培养液OD600达到预设诱导起点的75%～90%，然后将培养温度升高至40℃继续培养0.5～1.5hr；（3）待培养液OD600达预设的1.4后，向培养液中添加诱导物，继续培养，菌体内可以产生显著的可溶性重组蛋白质。
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